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申请/专利权人：通辽市圣达生物工程有限公司

摘要：本发明涉及生物工程技术领域，具体公开了一种高纯度乳酸链球菌素的提取方法，所述提取方法包括：利用活化培养基活化乳酸链球菌后，将活化菌株转接入种子培养基中培养获得种子液，将种子液接种至发酵培养基中，培养完成后得乳酸链球菌素发酵液；将乳酸链球菌素发酵液经过滤处理后，加入大孔吸附树脂搅拌条件下静态吸附，待吸附完全后，用纯化水洗涤，得饱和吸附树脂；将饱和吸附树脂灌入树脂柱中，加解吸剂进行动态解吸，得解吸液；向解吸液加入氯化钠盐析，分层处理、抽滤后旋蒸、低温烘干即得。本发明获得的发酵液Nisin产量高，采用复合解吸剂解吸彻底，Nisin总提取收率高，纯度高，颜色白度高且差异性低。

主权项：1.一种高纯度乳酸链球菌素的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、利用活化培养基活化乳酸链球菌后，将活化菌株转接入种子培养基中培养获得种子液，将种子液接种至发酵培养基中，培养完成后得乳酸链球菌素发酵液；S2、将乳酸链球菌素发酵液经过滤处理后，加入大孔吸附树脂，调节pH为3.0-7.0，温度20-40℃，搅拌条件下静态吸附，待吸附完全后，用纯化水洗涤，得饱和吸附树脂；S3、将饱和吸附树脂灌入树脂柱中，加解吸剂进行动态解吸，控制解吸流速为1-2BVh，得解吸液；S4、将解吸液pH调至2.0-3.0，加入氯化钠进行盐析处理，盐析液抽滤后旋蒸、低温烘干，即得高纯度乳酸链球菌素；所述步骤S1中种子培养基的配方为：蛋白胨8-12gL、牛肉膏8-12gL、酵母提取物5-8gL、磷酸氢二钾1-3gL、柠檬酸三铵1-3gL、乙酸钠5-8gL、葡萄糖20-25gL、吐温801-2mLL、七水硫酸镁0.4-0.6gL、四水硫酸锰0.2-0.4gL、氯化钠10-12gL、pH6.4-6.8；所述步骤S1中发酵培养基的配方为：在种子培养基中加入20-25gL的复合营养素；所述复合营养素由以下方法制得：（1）将小叶海藻和马尾松松针预烘干后按质量比2-4:1混合粉碎，过40-60目筛，得混合粉末；（2）将混合粉末加50-60℃的去离子水搅拌均匀后浸泡8-10h，加热沸腾提取0.5-1h后降温至30-40℃保温得提取液，加复合菌剂，调节pH值至4.5-5.5，密封发酵30-40h后离心、干燥得复合营养素。

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