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申请/专利权人：中启源(宁夏)生物科技有限公司
摘要：本发明公开了一种CD344+人胎盘间充质干细胞的制备及其应用，属于细胞生物技术领域，本申请研究发现，表达CD344的人胎盘间充质干细胞能够显著增加间充质干细胞的活性和增殖能力，并提高其对肺纤维化的治疗效果。本申请成功制备了CD344+人胎盘间充质干细胞，并进行了增值检测，结果显示CD344+亚群细胞具有更强的增殖能力，另外进行了CD344+人胎盘间充质干细胞治疗肺纤维化的疗效评估果显示CD344+亚群细胞具有更好的抗纤维化效果。本申请的研究成果在肺纤维化治疗中将有广阔的应用前景。
主权项：1.一种CD344+人胎盘间充质干细胞的制备，其特征在于，包括如下步骤：1将人胎盘胎儿侧0.5cm厚的组织切成1mm3大小，经PBS冲洗，利用100Uml的胶原酶A和10μgml的DNaseI在37℃下消化组织2h，收集上清，用100μm细胞筛过滤，去除残留组织块；2将分离的细胞在540g下离心10min，培养于含1×GlutaMAXTM和50μgml庆大霉素的NuwacellncMissionhMSCMedium，置于37℃、5％CO2及饱和湿度培养箱培养；3约至80％融合度，利用TrypLETMExpress消化并收集单个细胞继续传代培养；4经TrypLETMExpress消化并重悬hfPMSCs于PBS溶液，制备成5×106个mL的细胞悬液，分别向100μL加入荧光基团标记的不同抗体及相应同型对照抗体，4℃避光孵育30min，加入500μL预冷PBS，1000rpm离心弃上清；5将细胞沉淀重悬于400μLPBS，利用流式细胞仪检测细胞各表面标志物的表达情况；6经TrypLETMExpress消化并重悬hfPMSCs于PBS溶液，制备成5×106个mL的细胞悬液，向100μL细胞悬液中加入荧光基团标记的CD344抗体及相应同型对照抗体，4℃避光孵育30min，加入500μL预冷PBS，1000rpm离心弃上清；7将细胞沉淀重悬于400μLPBS，利用流式细胞仪检测细胞CD344的表达情况并分选出CD344+人胎盘间充质干细胞并通过流式细胞术进行验证。
全文数据：
权利要求：
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