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申请/专利权人：广州沙艾生物科技有限公司
摘要：本发明提供了一种脐带间充质干细胞制备方法，取健康良好脐带经贴壁法培养人脐带间充质干细胞，传代至P4～P6代后，消化物消化，清洗；将清洗后的人脐带间充质干细胞加入培养基复合液中；收集表达率＞95％的人脐带间充质干细胞；进行热循环试验3～6次；2～8℃条件下放置12～15小时，流式细胞术检测细胞存活率，收集存活率＞90％的人脐带间充质干细胞；将制剂置于2～5℃稳定性保存箱内，光照6～8小时，收集存活率＞85％的人脐带间充质干细胞群；冷冻储存。本发明脐带间充质干细胞制备方法选择恰当的传代细胞和细胞密度，依次结合热循环试验、2～8℃条件下放置、2～5℃光照处理后，收集特定的细胞群后，制备得到的脐带间充质干细胞，冷冻保存时间长，冷冻保存后存活率更高。
主权项：1.一种脐带间充质干细胞制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：1取健康良好脐带经贴壁法培养人脐带间充质干细胞，传代至P4～P6代后，胰酶替代物或胰蛋白胨酶消化物消化，清洗；2将清洗后的人脐带间充质干细胞加入培养基复合液中，细胞密度为2～10×105mL；3流式检测细胞表型CD73、CD90、CD105，收集表达率＞95％的人脐带间充质干细胞；4进行热循环试验3～6次，每次热循环程序包括1～10℃下保持50～70分钟，24±2～26±2℃下持续50～70分钟，流式细胞术检测细胞存活率及细胞表型变化，收集CD73、CD90、CD105表型＞90％的人脐带间充质干细胞；52～8℃条件下放置12～15小时，流式细胞术检测细胞存活率，收集存活率＞90％的人脐带间充质干细胞；6将制剂置于2～5℃稳定性保存箱内，光照强度调整为4000～5500Lux，光照6～8小时，收集存活率＞85％的人脐带间充质干细胞群；7冷冻储存。
全文数据：
权利要求：
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