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有效降低脐带间充质干细胞污染率的消毒制备方法及其应用 

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申请/专利权人:深圳市北科生物科技有限公司;哈尔滨北科健康科技有限公司

摘要:本发明公开一种有效降低脐带间充质干细胞污染率的消毒制备方法及其应用,涉及细胞技术领域,该种有效降低脐带间充质干细胞污染率的消毒制备方法包括包括如下步骤:S1、采用消毒剂处理脐带样本;S2、接种到细胞培养瓶中;S3、于培养箱内培养,培养至第五天,进行全量换液操作;S4、根据细胞贴壁融合度进行下一步操作;S5、当贴壁融合度低于50%时,于37℃、5%CO2浓度的培养箱内继续培养;S6、若贴壁融合度高于50%时,进行第一次传代操作,再传代至P2代收获细胞做为细胞系种子细胞冻存;使用本申请提供的消毒制备方法,可有效降低一脐带间充质干细胞制备污染发生率,避免成本上的损失,以及因微生物污染对干细胞治疗受者健康的影响。

主权项:1.一种有效降低脐带间充质干细胞污染率的消毒制备方法,其特征在于:包括如下步骤:S1、采用消毒剂处理脐带样本,取出脐带样本,采用洗脱溶剂洗涤,用消毒剂对残留泡沫消毒;S2、剥离脐带华通氏胶组织,并剪成2-4mm3的组织,840g离心5min接种到细胞培养瓶中;S3、于培养箱内培养,培养至第五天,进行全量换液操作;S4、继续培养六天,显微镜下观察细胞融合度,根据细胞贴壁融合度进行下一步操作;S5、当贴壁融合度低于50%时,进行半量换液操作,吸取90%培养瓶内培养一半的培养基弃去,并补足同样体积的新鲜培养基,于37℃、5%CO2浓度的培养箱内继续培养三天再观察融合度;S6、若贴壁融合度高于50%时,进行第一次传代操作,细胞消化并进行细胞收集,取样计数后,离心、接种并培养;再传代至P2代收获细胞做为细胞系种子细胞冻存。

全文数据:

权利要求:

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