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miR-423-5p高丰度工程化囊泡的构建及应用 

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申请/专利权人:昆明医科大学附属口腔医院(云南省口腔医院)

摘要:本发明公开了一种miR‑423‑5p高丰度工程化囊泡的构建及应用,属于生物医药技术领域。本发明构建的工程化囊泡具备和天然囊泡一样的双层膜结构,相近的粒径和电位值以及相似的标志蛋白表达,并且本发明构建的工程化囊泡内的miR‑423‑5p表达水平为天然囊泡的10万倍,同时能通过被牙周膜干细胞内化,将自身携带的miR‑423‑5p递送至牙周膜干细胞,使细胞内的miR‑423‑5p含量上调338倍,并能在胞内存留至少14d。此外,本发明构建的miR‑423‑5p高丰度工程化囊泡能有效增强天然囊泡的成骨效能,显著促进牙周膜干细胞成骨向分化。

主权项:1.一种miR-423-5p高丰度工程化囊泡的构建方法,其特征在于,所述miR-423-5p高丰度工程化囊泡包括小细胞外囊泡和miR-423-5p,所述miR-423-5p的正链核苷酸序列为:UGAGGGGCAGAGAGCGAGACUUU,反链核苷酸序列为:AAAGUCUCGCUCUCUGCCCCUCA;所述小细胞外囊泡为牙囊干细胞分泌的小细胞外囊泡;所述miR-423-5p高丰度工程化囊泡的构建方法包括以下步骤:(1)将miR-423-5p与核酸转染试剂混匀,随后加入小细胞外囊泡进行孵育;(2)将步骤(1)所得物放入吸附柱中离心,制得miR-423-5p小细胞外囊泡;(3)将miR-423-5p小细胞外囊泡加入超滤管中进行纯化浓缩,保留上层液体,制得。

全文数据:

权利要求:

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