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申请/专利权人：桂林中辉科技发展有限公司;桂林乐尔医疗器械有限公司

摘要：本发明公开了一种快速测量淀粉酶的电化学试纸及其制备与检测方法，所述的电化学试纸包括绝缘基片，以及设置在绝缘基片上的两个相互独立的检测体系，检测体系包括设置在绝缘基片中的导液槽体，导液槽体包括独立的第一导液槽和第二导液槽，第一导液槽设有第一进样口，第二导液槽设有第二进样口；还包括导电膜层、反应膜层和固化层，所述导电膜层设置在绝缘基片上，导电膜层包括相互绝缘的第一参比电极、第一工作电极、第二参比电极和第二工作电极；反应膜层包括至少一种电子介体，至少一种与被检测物质反应的酶。该电化学试纸与多参数分析仪配套使用，能快速定量检测血液或尿液中的淀粉酶活性，具有灵敏度高、测量结果准确、使用方便的优点。

主权项：1.一种快速测量淀粉酶的电化学试纸，其特征在于，包括绝缘基片，以及设置在绝缘基片上的两个相互独立的检测体系，所述检测体系包括设置在绝缘基片中的导液槽体，所述导液槽体包括独立的第一导液槽和第二导液槽，第一导液槽设有第一进样口，第二导液槽设有第二进样口；还包括导电膜层，所述导电膜层设置在绝缘基片上，所述导电膜层包括相互绝缘的第一参比电极、第一工作电极、第二参比电极和第二工作电极；反应膜层，所述反应膜层包括第一反应膜和第二反应膜，第一反应膜覆盖于第一参比电极、第一工作电极上；第二反应膜覆盖于第二参比电极和第二工作电极上；所述导液槽体设置在导电膜层上，所述导液槽体将第一反应膜和第二反应膜分隔在独立的导液槽内，第一反应膜设置在第一导液槽内，第二反应膜设置在第二导液槽内；固化层，所述固化层覆贴在导液槽体上，露出第一参比电极的第一引脚、第一工作电极的第二引脚、第二参比电极的第三引脚和第二工作电极的第四引脚；所述反应膜层包括至少一种电子介体，至少一种与被检测物质反应的酶；所述电子介体为铁氰化钾、亚铁氰化钾、二茂铁及其衍生物、钌的络合物或苯醌类化合物，电子介体的重量百分比含量为3％-20％；酶的重量百分比含量为0.5％-2.0％；所述的快速测量淀粉酶的电化学试纸通过设置双电极系统，一个电极系统测试淀粉酶分解底物产生的葡萄糖电流与样品中葡萄糖总电流，一个电极系统测试样品中葡萄糖电流，通过算法计算淀粉酶产生的葡萄糖的反应电流，从而消除样品中葡萄糖的干扰；所述第一反应膜其中的酶为α-葡萄糖苷酶及葡萄糖氧化酶，电子介体为铁氰化钾；第二反应膜其中的酶为葡萄糖氧化酶，电子介体为铁氰化钾；所述的固化层为浆液中含有亲水材料的亲水膜；所述亲水材料为曲拉通-100或十二烷基硫酸钠或吐温-20；所述亲水膜中含有增稠剂；第一导液槽设有第一排气口，第二导液槽设有第二排气口；所述的快速测量淀粉酶的电化学试纸的制备方法，包括如下步骤：1采用丝网印刷技术在0.20mm-0.30mm绝缘基片上印刷导电膜层，通过丝网印刷将导电油墨在绝缘基片上铺上分散均匀的油墨薄层后，放到75℃-85℃烘箱中烘干60min；2通过喷酶机将第一反应膜层酶液喷涂到第一参比电极、第一工作电极上，接着通过喷酶机将第二反应膜层酶液喷涂到第二参比电极、第二工作电极上，然后，50℃烘干20min，备用，所取第一反应膜层酶液的各组分及其重量百分比见表1：表1第一反应膜层酶液的各组分及其重量百分比 材料 重量百分比 淀粉 2％ α-葡萄糖苷酶 0.5％ 葡萄糖氧化酶 1％ 铁氰化钾 10％ 羧甲基纤维素 1％ 海藻糖 1％ 柠檬酸缓冲液，pH＝6.0 84.5％ 所取第二反应膜层酶液的各组分及其重量百分比见表2：表2第二反应膜层酶液的各组分及其重量百分比 材料 重量百分比 葡萄糖氧化酶 1％ 铁氰化钾 10％ 羧甲基纤维素 1％ 海藻糖 1％ 柠檬酸缓冲液，pH＝6.0 87％ 3把导液槽体粘贴到绝缘基片；4把含有亲水膜的固化层贴到导液槽体上，制作成淀粉酶试纸。

全文数据：一种快速测量淀粉酶的电化学试纸及其制备与检测方法技术领域[0001]本发明涉及一种人体体外诊断试剂的检测领域，具体涉及一种快速测量淀粉酶的电化学试纸及其制备与检测方法。背景技术[0002]淀粉酶AMY或AMS全称是l，4-a-D_葡聚糖水解酶，催化淀粉及糖原水解，生成葡萄糖、麦芽糖及含有a1，6-糖苷键支链的糊精。淀粉酶主要由胰腺和唾液腺分泌，肺、肝、甲状腺、脂肪等组织亦含有此酶。[0003]急性胰腺炎病人胰淀粉酶溢出胰腺外，迅速吸收入血，由尿排出，故血尿淀粉酶大为增加，血清淀粉酶在发病后1〜2小时即开始增高，8〜12小时标本最有价值，至24小时达最高峰，并持续24〜72小时，2〜5日逐渐降至正常，而尿淀粉酶在发病后12〜24小时开始增高，48小时达高峰，维持5〜7天，下降缓慢。故胰腺炎后期测尿淀粉酶更有价值。一般情况下，血清淀粉酶在增高频率以及程度上都不及尿淀粉酶检测，当血清活性淀粉酶回归常态后，尿淀粉酶活性仍然可以持续6天左右，这也是尿淀粉酶检测的敏感度和特异度都高于血淀粉酶检测的原因所在。[0004]对于曾经急性胰腺炎发作过的病人，在日常监控淀粉酶十分必要，特别是在喝酒或吃了油腻食品后，及时监测血液或尿液淀粉酶，发现淀粉酶急剧升高，及时到医院就医，可以使病情能及时制止，减轻就医时的病情，减少治疗费用。胰腺炎病人日常监控淀粉酶十分必要，发作时早几个小时到医院就医，病情就完全不一样。[0005]血清和尿液淀粉酶活性测定方法有多种，主要有碘化-淀粉比色法、酶速率法，无论是碘化-淀粉比色法还是酶速率法，均需要在半自动多参数分析仪或全自动多参数分析仪检测，患者需要到医疗机构才能获得检测服务，时间长，且不能在家自我监测。[0006]因此，为了腹痛病人或胰腺炎病人在家自我监测淀粉酶浓度，需要一种测试灵敏度高、准确、可靠的测试体液淀粉酶的方法和试剂。这样的设备应是价格便宜、方便制造和使用、并且能小型化适合家用的。发明内容[0007]本发明要解决的技术问题是针对现有技术中存在的不足，提供一种快速测量淀粉酶的电化学试纸及其制备与检测方法。该电化学试纸与多参数分析仪配套使用，能快速30s定量检测血液或尿液中的淀粉酶活性，具有灵敏度高、测量结果准确、使用方便的优点。[0008]为实现本发明的目的，本发明采用如下技术方案：一种快速测量淀粉酶的电化学试纸，包括绝缘基片，以及设置在绝缘基片上的两个相互独立的检测体系，所述检测体系包括设置在绝缘基片中的导液槽体，所述导液槽体包括独立的第一导液槽和第二导液槽，第一导液槽设有第一进样口，第二导液槽设有第二进样口；还包括导电膜层，所述导电膜层设置在绝缘基片上，所述导电膜层包括相互绝缘的第一参比电极、第一工作电极、第二参比电极和第二工作电极；反应膜层，所述反应膜层包括第一反应膜和第二反应膜，第一反应膜覆盖于第一参比电极、第一工作电极上;第二反应膜覆盖于第二参比电极和第二工作电极上；所述导液槽体设置在导电膜层上，所述导液槽体将第一反应膜和第二反应膜分隔在独立的导液槽内，第一反应膜设置在第一导液槽内，第二反应膜设置在第二导液槽内；固化层，所述固化层覆贴在导液槽体上，露出第一参比电极的第一引脚、第一工作电极的第二引脚、第二参比电极的第三引脚和第二工作电极的第四引脚；所述反应膜层包括至少一种电子介体，至少一种与被检测物质反应的酶；所述电子介体为铁氰化钾、亚铁氰化钾、二茂铁及其衍生物、钌的络合物或苯醌类化合物，电子介体的含量为3%WW-20%WW;酶的重量百分比含量为0.5%-2.0%。[0009]所述第一反应膜其中的酶为α-葡萄糖苷酶及葡萄糖氧化酶，电子介体为铁氰化钾;第二反应膜其中的酶为葡萄糖氧化酶，电子介体为铁氰化钾。[0010]所述的固化层为浆液中含有亲水材料的亲水膜。[0011]所述亲水材料为曲拉通-100或十二烷基硫酸钠或吐温-20。[0012]所述亲水膜中含有增稠剂。[0013]第一导液槽设有第一排气口，第二导液槽设有第二排气口。[0014]上述的快速测量淀粉酶的电化学试纸的制备方法，包括如下步骤：1采用丝网印刷技术在0.20mm-0.30mm绝缘基片上印刷导电膜层，通过丝网印刷将导电油墨在绝缘基片上铺上分散均匀的油墨薄层后，放到75°C_85°C烘箱中烘干60min;2通过喷酶机将第一反应膜层酶液喷涂到第一参比电极、第一工作电极上，接着通过喷酶机将反应膜层酶液喷涂到第二参比电极、第二工作电极上，然后，50°C烘干20min，备用，所取第一反应膜层酶液的各组分及其重量百分比见表1:表1第一反应膜层酶液的各组分及其重量百分比所取第二反应膜层酶液的各组分及其重量百分比见表2:表2第二反应膜层酶液的各组分及其重量百分比3把导液槽体粘贴到绝缘基片；4把含有亲水膜的固化层贴到导液槽体上，制作成淀粉酶试纸。[0015]还包括步骤5，将印有商标的上盖粘贴到亲水膜上。[0016]—种快速测量淀粉酶的电化学检测方法，包括上述的快速测量淀粉酶的电化学试纸，所述方法包括如下步骤：一、制作线性曲线图：采集新鲜静脉血液，调整红细胞压积比为40%，配制淀粉酶活性为10UL，25UL，50UL，100UL，250UL，500UL，1000UL的血样；将所述快速测量淀粉酶的电化学试纸置于多参数分析仪中，并在工作电极和参比电极两端施加300mV工作电压；每个血样使用一片所述的快速测量淀粉酶的电化学试纸，分别取上述的血样加到采样口，通过虹吸作用自动吸取约5nL样品分别进入反应区1与第一反应膜、及反应区2与第二反应膜中的试剂反应，测量第一工作电极电流11，电流11包括淀粉酶分解底物形成的葡萄糖及样品中葡萄糖反应电流;测量第二工作电极电流12，所述电流12包括仅包含样品中葡萄糖反应电流；电流11减去电流12得到电流13，13即为样品中淀粉酶分解底物形成的葡萄糖反应电流，此电流的大小与样品中淀粉酶活性成正比；以淀粉酶活性为横坐标，电流为纵坐标，绘制出淀粉酶活性与电流13的线性曲线图；淀粉酶活性与电流13的线性关系见图2;二、测量未知样品的淀粉酶活性值：将所述快速测量淀粉酶的电化学试纸置于多参数分析仪中，并在工作电极和参比电极两端施加300mV工作电压；取未知样品加到采样口，通过虹吸作用自动吸取约5uL样品分别进入反应区1与第一反应膜、及反应区2与第二反应膜中的试剂反应，通过多参数分析仪测量第一工作电极电流II，测量第二工作电极电流12;电流Il减去电流12得到电流13;电流13值对应的淀粉酶活性值可从上述线性曲线图中得出，从而得到未知样品的淀粉酶活性值。[0017]用上述方法定标，将得到的线性曲线输入到配套的多参数分析仪的存储设备中，未知样品的淀粉酶活性可以直接从多参数分析仪中读出。[0018]血浆或尿液中淀粉酶催化淀粉分子中α-l，4糖苷键水解产生麦芽糖，麦芽糖在α-葡萄糖苷酶催化下产生葡萄糖，葡萄糖与葡萄糖氧化酶及电子介体反应产生电流，测量淀粉酶催化淀粉所产生的葡萄糖的电流，即可定量测定样品中淀粉酶活性。血液包括血浆和血细胞，血浆呈淡黄色，半透明，血浆中含有大量的水约占91%—92%，还含有蛋白质、葡萄糖、无机盐等，食物中的营养物质必须经过消化变成小分子的物质才能被消化道吸收进入血液。水是小分子物质，不需消化直接被吸收;氨基酸是蛋白质消化的最终产物，经小肠吸收后进入血液中；麦芽糖是淀粉在淀粉酶作用下初步消化后的产物，还不能被吸收，必需最终消化为葡萄糖才能被吸收，因而，血液中通常不含有麦芽糖。然而，样品如血液或者尿液中含有未知浓度的葡萄糖，如将样品中原有的葡萄糖所产生的电流当做淀粉酶分解底物的电流计算淀粉酶活性，必然会造成结果假性增高。[0019]本发明的淀粉酶试纸通过设置双电极系统，一个电极系统测试淀粉酶分解底物产生的葡萄糖电流与样品中葡萄糖总电流，一个电极系统测试样品中葡萄糖电流，通过算法计算淀粉酶产生的葡萄糖的反应电流，从而消除样品中葡萄糖的干扰。该淀粉酶试纸有高的灵敏度及宽的线性范围，因此能快速的检测生物液体比如血液或尿液的淀粉酶活性。由于本发明的淀粉酶试纸消除了样品中葡萄糖的干扰，因此用本发明的淀粉酶试纸能快速、准确的分析淀粉酶活性。[0020]与现有技术相比，本发明的电化学测量淀粉酶的方法实现了高灵敏度、高准确度定量检测。该淀粉酶试纸与测试仪配套使用，操作简便，测试效果更快速、准确、可靠。附图说明[0021]此处所说明的附图用来提供对本发明的进一步理解，构成本发明的一部分，并不构成对本发明的限定。在附图中：图1为本发明实施例中淀粉酶试纸的结构分解示意图；图2为本发明实施例中电化学淀粉酶试纸线性关系图；图3为比较例电化学淀粉酶试纸线性关系图。[0022]图中标示：1.绝缘基片2-1.第一导液槽2-2.第二导液槽3-1.第一进样口3-2.第二进样口4-1.第一参比电极4-2.第一工作电极4-3.第二参比电极4-4.第二工作电极5-1.第一反应膜5-2.第二反应膜6-1.第一排气口6-2.第二排气口7.固化层8-1.第一引脚8-2.第二引脚8-3.第三引脚8-4.第四引脚。具体实施方式[0023]结合实施例和附图，对本发明实施作进一步详细说明。在此，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明。任何熟悉此项技术的人士可轻易做到的修饰及改变均包含于本案所附申请专利权利要求的范围内。[0024]实施例1:在本实施例中，参见图1，一种快速测量淀粉酶的电化学试纸，包括绝缘基片1，以及设置在绝缘基片1上的两个相互独立的检测体系，所述检测体系包括设置在绝缘基片1中的导液槽体，所述导液槽体包括独立的第一导液槽2-1和第二导液槽2-2,第一导液槽2-1设有第一进样口3-1，第二导液槽2-2设有第二进样口3-2;还包括导电膜层，所述导电膜层设置在绝缘基片1上，所述导电膜层包括相互绝缘的第一参比电极4-1、第一工作电极4-2、第二参比电极4-3和第二工作电极4-4;反应膜层，所述反应膜层包括第一反应膜5-1和第二反应膜5-2,第一反应膜5-1覆盖于第一参比电极4-1、第一工作电极4-2上;第二反应膜5-2覆盖于第二参比电极4-3和第二工作电极4-4上；所述导液槽体设置在导电膜层上，所述导液槽体将第一反应膜5-1和第二反应膜5-2分隔在独立的导液槽内，第一反应膜5-1设置在第一导液槽2-1内，第二反应膜5-2设置在第二导液槽2-2内；固化层7,所述固化层7覆贴在导液槽体上，露出第一参比电极4-1的第一引脚8-1、第一工作电极4-2的第二引脚8-2、第二参比电极4-3的第三引脚8-3和第二工作电极4-4的第四引脚8-4;第一引脚8-1、第二引脚8-2、第三引脚8-3、第四引脚8-4与多参数分析仪的试纸连接器实现电连接；所述反应膜层包括至少一种电子介体，至少一种与被检测物质反应的酶;还包括缓冲液、粘合剂及表面活性剂，所述电子介体为铁氰化钾、亚铁氰化钾、二茂铁及其衍生物、钌的络合物或苯醌类化合物，电子介体的含量为3%WW-20%WW;酶的重量百分比含量为0.5%-2.0%。[0025]所述第一反应膜5-1其中的酶为α-葡萄糖苷酶及葡萄糖氧化酶，电子介体为铁氰化钾;第二反应膜5-2其中的酶为葡萄糖氧化酶，电子介体为铁氰化钾。[0026]所述的固化层7为浆液中含有亲水材料的亲水膜，亲水膜层起到加速样品吸入的作用。[0027]所述亲水材料为曲拉通-100或十二烷基硫酸钠或吐温-20。[0028]所述亲水膜中含有增稠剂。[0029]第一导液槽2-1设有第一排气口6-1，第二导液槽2-2设有第二排气口6-2。[0030]样品溶液可透过所述反应膜层后，进入覆盖有反应膜层的电化学电极反应区，与电子介体及氧化还原酶进行反应。[0031]本文中所说的绝缘基片1系指具有平直的表面及电绝缘特性的薄层片。较佳地，该绝缘基片选自下列所组成的群：聚氯乙烯PVC片、聚酯、聚碳酸酯PC片、聚丙烯PP片、聚乙烯PE片、聚酰胺PA片、聚苯乙烯PS片。本例绝缘基片1为PC或PET片，厚度为0.10-0.45mm〇[0032]本文中所说的导电膜层，系指能起到电导通的层，可以是分离且互不相接触的电极，充当工作电极和参比电极，也可是仅仅起到电连接的导电结构。根据本发明的一较佳实施例，电极一端分别形成工作电极和参比电极而与电化学电极反应区相连，而另一端则形成工作电极和参比电极的接头，可与检测样品在电化学反应时产生电效应的检测装置相连。较佳地，该电极系统的材料可选用适合网版印刷的导电性浆状材质，例如但不限于碳胶、金胶、银胶、碳银混合胶或其它任何适合网版印刷的导电性浆状材料。[0033]本文中所说的反应膜层，系指位于上述电化学电极反应区，含有与被测物质反应的生物试剂。反应膜层中包括与被测物质反应的酶和一种电子传递介体，同时还含有缓冲液、粘合剂及表面活性剂的调配物薄层。较佳地，该调配物可以印刷涂覆或滴加的方式加至该反应层后，于60°C下干燥。[0034]本文中所说的氧化还原酶，系指可与样品中的待测标志物产生氧化还原反应的酶。所使用酶种类视所欲检测的标志物不同而有所不同。例如，欲检测葡萄糖浓度时，所选用的酶为葡萄糖氧化酶。[0035]本文中所说的电子介体，系指可与经前述氧化还原酶作用所产生的物质反应后，本身可由氧化状态还原成还原状态的物质。所述电子传递介体可以是铁氰化钾、亚铁氰化钾、二茂铁及其衍生物、钌的络合物或苯醌类化合物。根据本发明的一个较佳具体实施例，该电子介体可为铁氰化钾。较佳地，该电子介体的含量为3%WW至20%WW。[0036]本文中所说的缓冲液、粘合剂及表面活性剂，系指可助于氧化还原酶及电子介体干燥后附着于绝缘基片上的物质，或可保护氧化还原的物质。所述缓冲液为磷酸缓冲液、MES缓冲液、柠檬酸缓冲液组成的组中的一种;所述粘合剂采用淀粉、糊精、明胶、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、海藻酸钠中的一种或几种;所述表面活性剂为TritonX-100、TW-20。[0037]本文中所说的固化层7,为浆液中含有亲水材料的亲水膜;亲水材料可以是曲拉通-100，十二烷基硫酸钠，吐温-20，气溶胶等表面活性剂;亲水膜中还可以含有增稠剂，比如羧甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、海藻酸钠等中一种或者两种。亲水浆液可以通过使用喷液机器滴加到基片上或通过印刷技术涂覆到基片上。[0038]本实施例提供一淀粉酶试纸的制备实例，从而说明本发明的淀粉酶试纸的制备方法。[0039]上述的快速测量淀粉酶的电化学试纸的制备方法，包括如下步骤：1采用丝网印刷技术在0.25mm绝缘基片1上印刷导电膜层，通过丝网印刷将导电油墨在绝缘基片IPET塑料基片上铺上分散均匀的油墨薄层后，放到80°C烘箱中烘干60min，导电碳墨来自美国Acheson公司；2通过喷酶机将第一反应膜层酶液喷涂到第一参比电极4-1、第一工作电极4-2上，接着通过喷酶机将反应膜层酶液喷涂到第二参比电极4-3、第二工作电极4-4上，然后，50°C烘干20min，备用，所取第一反应膜层酶液的各组分及其重量百分比见表1:表1第一反应膜层酶液的各组分及其重量百分比所取第二反应膜层酶液的各组分及其重量百分比见表2:表2第二反应膜层酶液的各组分及其重量百分比3把导液槽体粘贴到绝缘基片1;4把含有亲水膜的固化层贴到导液槽体上，制作成淀粉酶试纸。[0040]还包括步骤5，将印有商标的上盖粘贴到固化层上。[0041]比较例1:本比较例制备淀粉酶试纸，除了不含有第二电极系统及第二反应膜层，其它与实施例1相同。[0042]实施例2:本实施例举例说明淀粉酶活性与电流线性关系，以及使用实施例1制备的淀粉酶试纸构建定标曲线方法。[0043]采集新鲜静脉血液，调整红细胞压积比为40%，配制淀粉酶活性为10UL，25UL，50UL，100UL，250UL，500UL，1000UL的血样，将实施例1制备的淀粉酶试纸，置于多参数分析仪中并在工作电极和参比电极两端施加300mV工作电压;取血样加到采样口，通过虹吸作用自动吸取约5此样品分别进入反应区1与第一反应膜5-1、及反应区2与第二反应膜5-2中的试剂反应，测量第一工作电极4-2电流11，电流11包括淀粉酶分解底物形成的葡萄糖及样品中葡萄糖反应电流;测量第二工作电极4-4电流12,所述电流12包括仅包含样品中葡萄糖反应电流；电流Il减去电流12得到电流13,13即为样品中淀粉酶分解底物形成的葡萄糖反应电流，此电流的大小与样品中淀粉酶活性成正比。淀粉酶活性与电流的线性关系见图2。用上述方法定标后，将得到的线性曲线输入到配套多参数分析仪的存储设备中，未知样品的淀粉酶活性可以直接从多参数分析仪中读出。[0044]比较例2:本比较例举例说明淀粉酶活性与电流线性关系，以及使用比较例1制备的淀粉酶试纸构建定标曲线方法。构建定标曲线的方法，除了使用的定标试纸是比较例1制备的淀粉酶试纸外，其它与实施例2相同。淀粉酶活性与电流的线性关系见图3。[0045]从图2和图3,我们可以发现，实施例1制作的淀粉酶试纸电流比比较例1制作的淀粉酶试纸低很多，斜率比比较例1制作的淀粉酶试纸低。主要是由于比较例1的淀粉酶试纸把样品中原有的葡萄糖反应电流也计算进去了。由于使用者血液中的葡萄糖浓度个体与个体差异很大，即使是同一个人，不同时间也会有很大差别，因而会干扰淀粉酶活性的测试。因而，在测试淀粉酶活性时，有必要消除样品中葡萄糖的干扰。本发明实施例1制作的淀粉酶试纸能较好的消除样品中的葡萄糖干扰。[0046]实施例3:本实施例举例说明用实施例2、比较例2构建的定标曲线，测定不同淀粉酶活性血样，说明不同葡萄糖浓度对测试结果的影响。[0047]收集不同淀粉酶活性、不同葡萄糖糖浓度血样。[0048]将实施例1制备的淀粉酶试纸，置于配套测试仪中并在工作电极和参比电极两端施加300mV工作电压;取血样加到采样口，通过虹吸作用自动吸取约5tiL样品分别进入反应区1与酶反应膜1及反应区2与酶反应膜2中试剂反应，测量第一电极系统工作电极电流II，电流Il包括淀粉酶分解底物形成的葡萄糖及样品中葡萄糖反应电流;测量第二电极系统工作电极电流12，所述电流12包括仅包含样品中葡萄糖反应电流；电流11减去电流12得到电流13,测试淀粉酶活性。[0049]同时，用YSI葡萄糖分析仪测试每一样品葡萄糖浓度，用淀粉酶试剂盒及全自动多参数分析仪测试每个样品淀粉酶活性。[0050]此外，将比较例1制备的淀粉酶试纸，置于多参数分析仪中并在工作电极和参比电极两端施加300mV工作电压；取血样加到采样口，通过虹吸作用自动吸取约5nL样品分别进入反应区1与第一反应膜及反应区2与第二反应膜中试剂反应，测量第一电极系统第一工作电极电流11，电流11包括淀粉酶分解底物形成的葡萄糖及样品中葡萄糖反应电流;测量第二电极系统第二工作电极电流12,所述电流12包括仅包含样品中葡萄糖反应电流；电流Il减去电流12得到电流13，测试淀粉酶活性。[0051]淀粉酶试纸及配套多参数分析仪测量不同淀粉酶活性、不同葡萄糖糖浓度血样结果、YSI葡萄糖分析仪测试葡萄糖结果、淀粉酶试剂盒及全自动多参数分析仪测试淀粉酶活性结果见表3。[0052]表3从表3中数据可以看出，用比较例1制作的淀粉酶试纸及比较例2构建的定标曲线，测定不同淀粉酶活性、不同葡萄糖糖浓度血样，同一血样，比较例1制作的淀粉酶试纸测试结果与淀粉酶试剂盒及全自动多参数分析仪测试结果差异很大，与样品中葡萄糖浓度有关，当葡萄糖浓度大于105mgdL时为正偏差，反之为负偏差，因为构建定标曲线时用的血样葡萄糖浓度为105mgdL。从中可以看出，比较例1制作的试纸，测试结果受到血样中葡萄糖浓度影响，且影响很大，临床无法接受。用实施例1制作的淀粉酶试纸及实施例2构建的定标曲线，测定不同淀粉酶活性、不同葡萄糖糖浓度血样，与淀粉酶试剂盒及全自动多参数分析仪测试结果非常接近，使用本发明的淀粉酶试纸能够准确测定实际样品淀粉酶活性。

权利要求：1.一种快速测量淀粉酶的电化学试纸，其特征在于，包括绝缘基片，以及设置在绝缘基片上的两个相互独立的检测体系，所述检测体系包括设置在绝缘基片中的导液槽体，所述导液槽体包括独立的第一导液槽和第二导液槽，第一导液槽设有第一进样口，第二导液槽设有第二进样口；还包括导电膜层，所述导电膜层设置在绝缘基片上，所述导电膜层包括相互绝缘的第一参比电极、第一工作电极、第二参比电极和第二工作电极；反应膜层，所述反应膜层包括第一反应膜和第二反应膜，第一反应膜覆盖于第一参比电极、第一工作电极上;第二反应膜覆盖于第二参比电极和第二工作电极上；所述导液槽体设置在导电膜层上，所述导液槽体将第一反应膜和第二反应膜分隔在独立的导液槽内，第一反应膜设置在第一导液槽内，第二反应膜设置在第二导液槽内；固化层，所述固化层覆贴在导液槽体上，露出第一参比电极的第一引脚、第一工作电极的第二引脚、第二参比电极的第三引脚和第二工作电极的第四引脚；所述反应膜层包括至少一种电子介体，至少一种与被检测物质反应的酶；所述电子介体为铁氰化钾、亚铁氰化钾、二茂铁及其衍生物、钌的络合物或苯醌类化合物，电子介体的含量为3%WW-20%WW;酶的重量百分比含量为0.5%-2.0%。2.根据权利要求1所述的快速测量淀粉酶的电化学试纸，其特征在于，所述第一反应膜其中的酶为α-葡萄糖苷酶及葡萄糖氧化酶，电子介体为铁氰化钾;第二反应膜其中的酶为葡萄糖氧化酶，电子介体为铁氰化钾。3.根据权利要求1所述的快速测量淀粉酶的电化学试纸，其特征在于，所述的固化层为浆液中含有亲水材料的亲水膜。4.根据权利要求3所述的快速测量淀粉酶的电化学试纸，其特征在于，所述亲水材料为曲拉通-100或十二烷基硫酸钠或吐温-20。5.根据权利要求4所述的快速测量淀粉酶的电化学试纸，其特征在于，所述亲水膜中含有增稠剂。6.根据权利要求1所述的快速测量淀粉酶的电化学试纸，其特征在于，第一导液槽设有第一排气口，第二导液槽设有第二排气口。7.权利要求1-6任一项所述的快速测量淀粉酶的电化学试纸的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1采用丝网印刷技术在0.20mm-0.30mm绝缘基片上印刷导电膜层，通过丝网印刷将导电油墨在绝缘基片上铺上分散均匀的油墨薄层后，放到75°C_85°C烘箱中烘干60min;2通过喷酶机将第一反应膜层酶液喷涂到第一参比电极、第一工作电极上，接着通过喷酶机将反应膜层酶液喷涂到第二参比电极、第二工作电极上，然后，50°C烘干20min，备用，所取第一反应膜层酶液的各组分及其重量百分比见表1:表1第一反应膜层酶液的各组分及其重量百分比所取第二反应膜层酶液的各组分及其重量百分比见表2:表2第二反应膜层酶液的各组分及其重量百分比3把导液槽体粘贴到绝缘基片；4把含有亲水膜的固化层贴到导液槽体上，制作成淀粉酶试纸。8.—种快速测量淀粉酶的电化学检测方法，其特征在于，包括权利要求1-6任一项所述的快速测量淀粉酶的电化学试纸，所述方法包括如下步骤：一、制作线性曲线图：采集新鲜静脉血液，调整红细胞压积比为40%，配制淀粉酶活性为10UL，25UL，50UL，100UL，250UL，500UL，1000UL的血样；将所述快速测量淀粉酶的电化学试纸置于多参数分析仪中，并在工作电极和参比电极两端施加300mV工作电压；每个血样使用一片所述的快速测量淀粉酶的电化学试纸，分别取上述的血样加到采样口，通过虹吸作用自动吸取约5nL样品分别进入反应区1与第一反应膜、及反应区2与第二反应膜中试剂反应，通过多参数分析仪测量第一工作电极电流Il，电流Il包括淀粉酶分解底物形成的葡萄糖及样品中葡萄糖反应电流;测量第二工作电极电流12,所述电流12包括仅包含样品中葡萄糖反应电流；电流Π减去电流12得到电流13，13即为样品中淀粉酶分解底物形成的葡萄糖反应电流，此电流的大小与样品中淀粉酶活性成正比；以淀粉酶活性为横坐标，电流为纵坐标，绘制出淀粉酶活性与电流13的线性曲线图；二、测量未知样品的淀粉酶活性值：将所述快速测量淀粉酶的电化学试纸置于多参数分析仪中，并在工作电极和参比电极两端施加300mV工作电压；取未知样品加到采样口，通过虹吸作用自动吸取约5此样品分别进入反应区1与第一反应膜、及反应区2与第二反应膜中的试剂反应，通过多参数分析仪测量第一工作电极电流II，测量第二工作电极电流12;电流Il减去电流12得到电流13;电流13值对应的淀粉酶活性值可从上述线性曲线图中得出，从而得到未知样品的淀粉酶活性值。

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