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申请/专利权人：浙江理工大学绍兴生物医药研究院有限公司;华中科技大学同济医学院附属同济医院;浙江理工大学
摘要：本发明公开的是一种携带长链非编码RNAH19基因溶瘤腺病毒的构建方法及应用，分别构建质粒PCD513‑H19、构建质粒pCA13‑H19、构建质粒pSD55‑H19、构建pAd‑H19、包装后获得携带长链非编码RNAH19基因的溶瘤腺病毒SD55‑H19，本发明溶瘤腺病毒的构建方法为肝内胆管癌的研究提供了新的思路和方法，采用本申请技术方案构建的溶瘤腺病毒对肝内胆管癌细胞有显著的抑制作用，从而为治疗肝内胆管癌的药物研究提供技术基础。
主权项：1.一种携带长链非编码RNAH19基因溶瘤腺病毒的构建方法，其特征在于该方法包括以下步骤：步骤1：构建携带H19的质粒PCD513-H19；步骤2：携带所述H19的质粒pCA13-H19；步骤3：构建携带H19序列的质粒pSD55-H19；步骤4：将所述的pSD55-H19线性化和去磷酸化，然后转化到感受态BJ5183-Adeasy53中，同源重组后获得携带H19序列的质粒pAd-H19；步骤5：将所述的pAd-H19线性化和去磷酸化后转染到HEK293A细胞，包装后获得所述携带长链非编码RNAH19基因的溶瘤腺病毒SD55-H19。
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