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申请/专利权人:天津科技大学
摘要:本发明专利公开了一种利用重组黑曲霉高效制备氢化可的松的新方法,属于基因工程技术领域。发明通过CRISPR‑Cas9编辑获得适合表达外源羟化酶的黑曲霉底盘菌株,并构建了高效异源表达新月弯孢11β‑羟化酶CYP5103B6T291YM365A突变体黑曲霉重组菌。以11‑脱氧皮质醇‑21醋酸酯为底物,投料量为4.5gL,转化72h,特异性可达91.3%,氢化可的松得率为82.6%。本发明为研究开发高效C11β‑羟化酶基因重组菌生产氢化可的松的工艺提供了技术方法和宝贵的工业菌种。
主权项:1.甾体11β-羟化酶基因突变体T291YM365A其特征在于,所述突变体的氨基酸序列是在如SEQIDNO:1所示的序列基础上进行突变,即突变体的291位氨基酸由原来的苏氨酸ACC变成亮氨酸TAC;365位氨基酸由原来的甲硫氨酸ATG突变成丙氨酸GCG,其序列SEQIDNO:2所示。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 天津科技大学 甾体11β-羟化酶突变体重组菌黑曲霉及其在制备氢化可的松中的应用
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