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摘要:本发明涉及燕窝配方技术领域,具体涉及一种燕窝与抗衰老因子复合配方及其加工工艺;本发明可提高皮肤的水合作用,增强弹性,减缓衰老迹象,帮助抵御自由基的伤害,保护细胞免受氧化压力,有助于增强免疫系统,提升身体抵抗力同时易于吸收,能改善肠道健康,促进营养吸收且对运动后恢复有积极作用,能够帮助修复肌肉组织;本发明的抗衰老组分与干细胞的自我更新和分化有关,因此在组织修复和再生中起着关键作用对维持干细胞的健康和功能可能对抗衰老具有积极影响,可以调节涉及细胞增殖和分化的Wnt信号通路,通过调控这些信号通路进而影响组织的老化过程同时能够调节组织快速修复进一步延缓衰老作用。
主权项:1.一种燕窝与抗衰老因子复合配方,其特征在于,由以下百分比的成份组成:2-5%燕窝提取物、1-3%维生素C、1-3%维生素E、0.5-1%辅酶Q10、10-15%绿茶提取物、1-3%白藜芦醇、1-2%赖氨酸、1-2%肌醇、3-6%白砂糖、0.5-2%LGR5抗衰老因子和58-78%纯水;其中所述LGR5抗衰老因子的制备方法包括以下步骤:A1:复苏含有LGR基因的CHO细胞至15cm培养皿中,使用移液枪加入15ml含10%FBS的DMEM-Highglucose培养基并丢弃使用过的移液管;A2:每两天使用移液枪更换一次含10%FBS的DMEM-Highglucose培养基,直至CHO细胞长满培养皿底部,每次使用移液枪需更换一根移液管,每次培养基加入量为15-20ml;A3:使用移液枪完全移除DMEM-Highglucose培养基,更换移液管后使用移液枪吸取5-10mlPBS缓冲液冲洗培养皿底部的残留FBS,冲洗完成后丢弃使用过的移液管;A4:使用移液枪吸取残留FBS缓冲液,更换移液管后使用移液枪加入3-5ml9%Tris-EDTA胰蛋白酶消化液,消化CHO细胞10-15min使CHO脱离培养皿底部悬浮于Tris-EDTA胰蛋白酶消化液中;A5:加入3-5ml含10%FBS的DMEM-Highglucose培养基终止Tris-EDTA胰蛋白酶的消化作用;A6:使用移液枪吸取培养皿中的混合物,转移至灭菌完成的15ml离心管中,配平后将离心管转移至低速离心机中,4000xg常温离心3-5min,离心完成后可在离心管底部见到CHO细胞沉淀;A7:倒去离心管上清,加入3-6ml含10%FBS的DMEM-Highglucose培养基,使用移液枪吹吸培养基使底部细胞沉淀重新悬浮在培养基中;A8:使用移液枪将CHO细胞悬浮液加入干净的T75培养瓶中,每瓶加入1.5-3mlCHO细胞悬浮液和20-30ml含10%FBS的DMEM-Highglucose培养基,轻轻倾斜瓶身使CHO细胞悬浮液覆盖满整个培养瓶底部;A9:每两天使用移液枪更换一次含10%FBS的DMEM-Highglucose培养基,直至CHO细胞长满培养瓶底部,每次使用移液枪需更换一根移液管,每次培养基加入量为20-30ml;A10:待CHO细胞铺满培养瓶底部70-80%后,使用移液枪完全移除DMEM-Highglucose培养基,更换移液管后使用移液枪吸取PBS缓冲液冲洗培养瓶底部残留的FBS并丢弃使用过的移液管;A11:使用移液枪在培养瓶中加入CHO无血清培养基,加入量为30-40ml,每天收集一次培养基,收集完成后重新补充培养基,收集2-3天;A12:在收集完成的CHO无血清培养基中加入5%甘露糖醇,随后分装入15cm培养皿中,舍弃培养皿顶盖,使用锡箔纸覆盖培养皿,使用20ul移液枪枪头在锡箔纸上扎15-20个小孔,将培养皿放入冻干机中,冻干48h,得到LGR5抗衰老因子。
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