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摘要:本发明公开了一种基于RPA‑CRISPR的虹鳟源性成分引物及检测体系和方法。本发明所述RPA引物和crRNA具有良好的特异性,所构建的鉴别方法呈现双重特异性,对其它物种无特异性识别反应,检测结果准确可靠。同时,本发明所述虹鳟源性成分鉴别方法,操作简便,耗时少,结果准确,适用于有关监督部门对三文鱼产品中虹鳟源性成分的现场快速检测。此外,本发明所述检测方法结合快速碱裂解法提取样品核酸,在不依赖于大型仪器情况下,对三文鱼制品中掺杂的虹鳟源性成分检测限可达1%(ww),对虹鳟基因组DNA的检测灵敏度为10‑2ngμL,适用于多种三文鱼加工产品中虹鳟源性成分鉴别检测,可靠性高。
主权项:1.一种用于鉴别虹鳟源性成分的RPA-CRISPRCas12a组合物,其特征在于,包括用于虹鳟源性成分快速鉴别的RPA引物O5-FO5-R、crRNA、CRISPRCas12a蛋白和FQ-ssDNA荧光探针;所述RPA引物O5-FO5-R的序列如SEQIDNO.1~2所示,所述crRNA的序列如SEQIDNO.3所示,所述FQ-ssDNA的序列如SEQIDNO.4所示。
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百度查询: 华南农业大学 一种基于RPA-CRISPR的虹鳟源性成分引物及检测体系和方法
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