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摘要:本发明涉及一种高效的基于哺乳动物细胞的蛋白进化平台。具体而言,本发明涉及具有单拷贝可替换序列的悬浮驯化的CHO细胞株,包含活化诱导的胞嘧啶脱氨基酶AID和单链DNA结合蛋白SSB的融合蛋白,和包含所述CHO细胞株和融合蛋白的连续高效的突变系统。本发明旨在解决现有技术进化平台中突变率低、表达不均一、难以构建单拷贝稳定细胞株、细胞株应用范围受限以及突变细胞株耐受性差的问题。
主权项:1.一种具有单拷贝可替换序列的悬浮驯化的CHO细胞株,所述可替换序列插入到CHO基因组中的稳定表达位点中,目的基因能够通过重组酶介导的盒式交换替换所述可替换序列。
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