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摘要:本发明提供了一种具有以天冬氨酸为底物的丙二酰辅酶A合成路径的基因重组工程菌株及其应用,涉及生物工程技术领域。本发明通过将具有天冬氨酸脱羧酶基因表达系统、单胺氧化酶基因表达系统、丙二酰辅酶A还原酶或CoA乙酰化醛脱氢酶基因表达系统的重组表达载体转染至底盘菌株感受态细胞中,可实现天冬氨酸脱羧酶、单胺氧化酶和丙二酰辅酶A还原酶的共表达,进而可以在转化细胞中实现以天冬氨酸为底物经生物合成得到丙二酰辅酶A的合成路径,有效提高细胞内的丙二酰辅酶A的代谢通量。使用上述重组表达载体构建得到的耶氏解脂酵母工程菌株,经验证可显著提高耶氏解脂酵母工程菌株中以丙二酰辅酶A为生物合成中间体的高值化合物的产量。
主权项:1.一种重组表达载体,其特征在于,所述重组表达载体的骨架载体是pYLXP’或pUrlp,且包括以下可操作性相连的元件:a天冬氨酸脱羧酶基因表达系统,该系统从5’到3’依次包括元件:启动子,天冬氨酸脱羧酶基因和终止子;和,b单胺氧化酶基因表达系统,该系统从5’到3’依次包括元件:启动子,单胺氧化酶基因和终止子;和,c丙二酰辅酶A还原酶基因表达系统,该系统从5’到3’依次包括元件:启动子,丙二酰辅酶A还原酶基因和终止子;所述a、b、c中的启动子为带有内含子序列的TEF启动子;所述a、b、c中的终止子为XPR2终止子。
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权利要求:
百度查询: 广东以色列理工学院 具有以天冬氨酸为底物的丙二酰辅酶A合成路径的基因重组工程菌株及其应用
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