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摘要:本发明涉及一种固定化方法,具体提供了一种共固定谷氨酸脱羧酶及其辅酶磷酸吡哆醛的方法,包括以下步骤:首先,向Fe3O4@PDA磁性纳米粒子中加入谷氨酸脱羧酶(GAD)酶液,调节反应pH为7‑9,经后处理,得到Fe3O4@PDA@GAD纳米粒子;然后,向Fe3O4@PDA@GAD纳米粒子中同时加入聚乙烯亚胺(PEI)溶液和磷酸吡哆醛溶液(PLP),调节反应pH为7‑10,振荡孵育后,经后处理,得到固定化酶Fe3O4@PDA@PEI@GADPLP。将本发明方法应用于γ‑氨基丁酸的制备,不仅避免了PLP流失,节约了成本,而且还能克服外源加入PLP导致的后续分离纯化困难的问题。
主权项:1.一种共固定谷氨酸脱羧酶及其辅酶磷酸吡哆醛的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)Fe3O4@PDA磁性纳米粒子共价结合谷氨酸脱羧酶:向Fe3O4@PDA磁性纳米粒子中加入谷氨酸脱羧酶酶液,调节反应pH为7-9,充分搅拌后,经后处理,得到Fe3O4@PDA@GAD纳米粒子;(2)Fe3O4@PDA@GAD接枝聚乙烯亚胺并吸附磷酸吡哆醛:向Fe3O4@PDA@GAD纳米粒子中同时加入聚乙烯亚胺溶液和磷酸吡哆醛溶液,调节反应pH为7-10,振荡孵育后,经后处理,即得到固定化酶Fe3O4@PDA@PEI@GADPLP。
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百度查询: 河北大学 一种共固定谷氨酸脱羧酶及其辅酶磷酸吡哆醛的方法
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