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摘要：公开了包含多种抗体的抗体文库，所述抗体具有来自人类中天然存在的记忆和初始B细胞的互补决定区的非天然存在的组合，并且其中所述抗体文库包含大量功能性和非冗余抗体。还公开了制备具有高水平的功能多样性的抗体文库的方法。

主权项：1.一种制备抗体文库的方法，包括：a从初始B细胞池获得多个VH-CDR3和VL-CDR3序列的序列信息，并从记忆B细胞池获得多个VH-CDR1、VH-CDR2、VH-CDR3、VL-CDR1、VL-CDR2和VL-CDR3序列的序列信息；b组装多个可变轻VL结构域序列，每个可变轻VL结构域序列包括：从步骤a中确定的来自记忆B细胞的序列信息获得的VL-CDR1序列，从步骤a中确定的来自记忆B细胞的序列信息获得的VL-CDR2序列，以及从步骤a中确定的来自记忆B细胞或初始B细胞的序列信息获得的VL-CDR3序列；c组装编码多个第一抗体的多个第一核酸序列，每个第一抗体包含：i.在步骤b中组装的可变轻VL结构域序列；和ii.单个固定的重链序列；d将所述多个第一核酸序列插入多个第一噬菌粒中；e用所述多个第一噬菌粒转化多种微生物以产生多个第一转化体，其中所述多个第一转化体在多个第一噬菌体的表面上表达所述多个第一抗体；f向所述多个第一噬菌体施加至少一种选择压力；g筛选表达具有结合蛋白能力的抗体的所述多个第一噬菌体，以产生包含多个第一核酸序列的子集的多个第一噬菌体的子集；h组装多个可变重VH结构域序列，每个可变重VH结构域序列包括：从步骤a中确定的来自记忆B细胞的序列信息获得的VH-CDR1序列，从步骤a中确定的来自记忆B细胞的序列信息获得的VH-CDR2序列，以及从步骤a中确定来自的记忆B细胞或初始B细胞的序列信息获得的VH-CDR3序列，其中所述VH-CDR3序列和所述VL-CDR3序列中的至少一个来自来自初始B细胞的序列信息；i用步骤h中组装的所述多个可变重VH结构域序列替换所述多个第一核酸序列的子集的所述单个固定的重链序列，以产生多个第二核酸序列，每个第二核酸序列包含：i.在步骤b中组装的可变轻VL结构域序列，和ii.在步骤h中组装的可变重VH结构域序列，其中所述多个第二核酸序列编码多个第二抗体；j将所述多个第二核酸序列插入多个第二噬菌粒中；k用所述多个第二噬菌粒转化多种微生物以产生多个第二转化体，其中所述多个第二转化体在多个第二噬菌体的表面上表达所述多个第二抗体。

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百度查询： 查尔斯河实验室公司 根本上多样的人类抗体文库