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摘要:本发明公开一种特异性小分子探针冻干技术,本技术包括以下步骤:S1、探针干粉溶解;S2、探针母液初次稀释;S3、探针母液二次稀释;S4、探针母液分装和S5、探针母液冻干。本发明采用bufferLyo‑ReadyqPCR稀释CTC探针母液,冻干buffer在冻干过程中生产骨架物质,使冻干过程中有良好的外形,在冻干过程最大限度地保存冻干物质原有的性质,让CTC探针冻干转化为干粉的同时最大限度地保证了CTC探针的稳定性,并且冻干过程包括冷冻区段和平衡区段,冷冻干燥能把大量水分物质,预先进行降温结成固体,然后在真空的条件下使水蒸气直接从固体升华排出,而物质本身留在冻结的冰架子中,从而使得干燥品不会丢失原有的固体骨架结构,保持物质原有形态,且冻干品复水性好。
主权项:1.一种特异性小分子探针冻干方法,其特征在于:所述方法包括以下步骤:S1、探针干粉溶解;S2、探针母液初次稀释;S3、探针母液二次稀释;S4、探针母液分装和S5、探针母液冻干,其中:S1、探针干粉溶解:称取定量的CTC探针干粉,然后向CTC探针干粉中注入定量的CTC探针稀释液进行溶解,制备成液态的CTC探针母液A;S2、探针母液初次稀释:向步骤S1中得到的CTC探针母液A中将入适量的CTC探针稀释液,将CTC探针母液A稀释成浓度为70-100μM的CTC探针母液B;S3、探针母液二次稀释:向步骤S2中的CTC探针母液B中加入冻干bufferLyo-ReadyqPCR,将CTC探针母液B的浓度稀释到10-15μM,得到CTC探针母液C;S4、探针母液分装:将步骤S3得到的CTC探针母液C分装到PCR管中;S5、探针母液冻干:将步骤S4中分装好的PCR管分别放入到冻干机中,拧开PCR管盖,然后根据预设的程序进行冻干,其中冻干过程包括冷冻区段和平衡区段;所述方法中冷冻区段包括有:阶段X1,在-70℃到-72℃的温度下,冻干80-85min;阶段X2,在-55℃到-57℃的温度下,冻干120-122min;阶段X3,在-40℃到-42℃的温度下,冻干60-65min;阶段X4,在-40℃到-42℃的温度下,冻干180-185min;阶段X5,在-45℃到-47℃的温度下,冻干270-275min;阶段X6,在-10℃到-15℃的温度下,冻干120-125min;平衡区段包括有:阶段X7,在4℃到5℃的温度下,冻干125-150min;阶段X8,在4℃到5℃的温度下,冻干120-122min;阶段X9,在15℃到27℃的温度下,冻干60-62min;所述方法中阶段X4、阶段X5、阶段X6、阶段X7、阶段X8和阶段X9均进行真空处理;所述方法中真空处理时产生的水蒸气均经过收集管导入到冷凝装置中进行回收,回收产生的液体加入到步骤S1中的CTC探针母液A再次进行处理,提高CTC探针的利用率,减少CTC探针冻干过程中的损耗。
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