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摘要：本发明公开了一种热稳定性和活性提高的酸性脂肪酶突变体及其应用，本发明采用半理性的设计策略，结合二硫键和氨基酸位点突变，获得热稳定性和活性提高的脂肪酶突变体随后采用组合优化策略，在毕赤酵母中实现了LIPR的高效表达，对LIPR的生物柴油制备能力进行了评估，通过连续流动系统，生物柴油产量得到明显提升。本发明有助于开发可重复使用的生物酶催化剂，用于生产生物柴油和其他化学品。
主权项：1.一种热稳定性和活性提高的酸性脂肪酶突变体，其特征在于：所述酸性脂肪酶突变体为在以下a1～a4的任何一种突变体氨基酸序列中选自以下i～vi的任何一种的取代：a1将如SEQIDNO.2所示的脂肪酶LIPR的氨基酸序列的第51位的Ala和第110位的Ser均突变成Cys，且两个Cys之间形成二硫键的突变体；a2将如SEQIDNO.2所示的脂肪酶LIPR的氨基酸序列的第126位的Ala和第238位的Phe均突变成Cys，且两个Cys之间形成二硫键的突变体；a3将如SEQIDNO.2所示的脂肪酶LIPR的氨基酸序列的第131位的Ala和第140位的Ala均突变成Cys，且两个Cys之间形成二硫键的突变体；a4将如SEQIDNO.2所示的脂肪酶LIPR的氨基酸序列的第255位的Ser和第261位的Val均突变成Cys，且两个Cys之间形成二硫键的突变体；i将所述突变体的氨基酸序列的58位的Glu突变成Gly；ii将所述突变体的氨基酸序列的139位的Glu突变成Leu；iii将所述突变体的氨基酸序列的196位的Asn突变成Val；iv将所述突变体的氨基酸序列的198位的Asp突变成Leu；v将所述突变体的氨基酸序列的214位的Asp突变成Leu；vi将所述突变体的氨基酸序列的250位的Glu突变成Leu。
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百度查询： 江南大学 一种热稳定性和活性提高的酸性脂肪酶突变体及其应用
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