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用于牛个体识别和亲子鉴定的微卫星标记引物组及其12-plex快速分型检测方法 

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申请/专利权人:沈阳农业大学;辽宁省农业发展服务中心

摘要:本发明属于分子生物学领域,具体涉及牛个体识别和亲子鉴定的微卫星标记12‑plex快速检测方法。本发明应用多重PCR技术,通过引物设计和大量试验,研发了一套基于微卫星标记的牛个体识别和亲子鉴定快速检测方法。包括:确定牛的12个微卫星位点并将所述12对微卫星引物合成12对荧光引物、PCR扩增得到12条目标微卫星序列及检测结果分析步骤。本发明简便、高效,可实现一次PCR反应同时获得12个牛微卫星标记的分型结果,扩增结果稳定且具有良好的灵敏度,适用于牛的个体识别、亲子鉴定,以及基于微卫星标记的牛群体遗传学研究。

主权项:1.一种用于牛个体识别和亲子鉴定的微卫星标记引物组,其特征在于:由12对微卫星引物序列组成,12对微卫星引物序列及携带的荧光标记为:微卫星位点ILSTS006,引物序列F:AACACGGAAGCAATCTAAAC,R:ACCCATGTCTCTGCAAATG;产物范围148-166bp,引物终浓度36nML,携带标记为FAM;微卫星位点BM1824,引物序列F:TAAACTAAAAGATAGTAGAGCAAGG,R:CTTCCTTGAAATGGTGCG;产物范围182-194bp,引物终浓度27nML,携带标记为FAM;微卫星位点INRA023,引物序列F:GTTGCTTTTACCTGGCTAAT,R:ACTTGGCAAATGAGTAGTAAAC;产物范围215-239bp,引物终浓度45nML,携带标记为FAM;微卫星位点ETH225,引物序列F:TAAATTGTGGGCCCTTGAT,R:CACAAGCACCATAATGCAAA;产物范围286-308bp,引物终浓度34nML,携带标记为FAM;微卫星位点ETH3,引物序列F:ACTGGAGTGACTTACATTTCC,R:CAAACCATGCCAGCGTG;产物范围370-398bp,引物终浓度24nML,携带标记为FAM;微卫星位点BM1818,引物序列F:GGAATGGCTATCACCGAAAC,R:GCATAGTGCTTTCAAGGTCCA;产物范围425-449bp,引物终浓度24nML,携带标记为FAM;微卫星位点SPS115,引物序列F:ACGAGACACCAGCAAAGAT,R:GGCAAAAGACACTAGAGGAAT;产物范围136-162bp,引物终浓度43nML,携带标记为HEX;微卫星位点TGLA227,引物序列F:AGTGAACCCCCAAAAATG,R:GCCCAGGAATTCCAAATC;产物范围171-199bp,引物终浓度49nML,携带标记为HEX;微卫星位点HAUT27,引物序列F:TTGATTTGCATTTCTCTACTAATAG,R:GCCATCATTATCTTTACTCTGAT;产物范围260-278bp,引物终浓度38nML,携带标记为HEX;微卫星位点ETH10,引物序列F:CTCCCCTACTCCATACCAG,R:TGTCCAGCGGGTTCAG;产物范围283-299bp,引物终浓度58nML,携带标记为HEX;微卫星位点BM2113,引物序列F:GCCCGTGTTTAGACCTGAT,R:CAAACGCCTAGCATGGTAT;产物范围343-365bp,引物终浓度27nML,携带标记为HEX;微卫星位点TGLA126,引物序列F:CTGGGCTTCCTTTCATTG,R:ATCTGGTCTTTGGACTGTTG;产物范围460-476bp,引物终浓度80nML,携带标记为HEX。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 沈阳农业大学 辽宁省农业发展服务中心 用于牛个体识别和亲子鉴定的微卫星标记引物组及其12-plex快速分型检测方法

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