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用于猫个体识别和亲子鉴定的微卫星标记引物组及其15-plex快速分型检测方法 

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申请/专利权人:沈阳农业大学

摘要:本发明属于分子生物学领域,具体涉及用于猫个体识别和亲子鉴定的微卫星标记引物组及其15‑plex快速分型检测方法。本发明选用15个四碱基重复微卫星标记结合多重PCR技术,研发了一套猫个体识别和亲子鉴定快速检测方法。包括:确定猫的14个微卫星位点和1个性别鉴定位点并将所述14对微卫星引物和1对性别鉴定位点引物合成15对荧光标记引物、PCR扩增得到14条目标微卫星序列和1个性别鉴定位点序列及检测结果分析步骤。本发明可实现一次PCR反应即获得14个猫四碱基微卫星标记的分型结果,同时鉴定性别,扩增结果稳定且具较高的灵敏度,可用于猫的个体识别和亲子鉴定。

主权项:1.用于猫个体识别和亲子鉴定的微卫星标记引物组,其特征在于,由14对微卫星引物序列和1对性别鉴定引物序列构成,引物序列及其所携带的荧光标记为:微卫星位点FCA559,引物序列F:TGTTCAAGAGTGGTTATCACTAG,R:GTAAGTTTTGGCTTGATGAG;产物范围211-239bp,引物终浓度180nML,携带标记为FAM;微卫星位点FCA747,引物序列F:AAGAAACTTCATACCCATTAGC,R:TCTGATATTCTCCTCAATGATG;产物范围188-204bp,引物终浓度145nML,携带标记为FAM;微卫星位点FCA740,引物序列F:CCACAGGTAAACATCAACC,R:ACATCTCCACATCTGTAGCC;产物范围249-268bp,引物终浓度110nML,携带标记为FAM;微卫星位点F27,引物序列F:CAGACTACTTTAGGTGCTACAAG,R:AAAGTTTAGAACTGATGTCTTTG;产物范围351-435bp,引物终浓度280nML,携带标记为FAM;微卫星位点F37,引物序列F:TCTCACATTACCATTCATCC,R:GGCTGGAAATAAGATTTGG;产物范围453-479bp,引物终浓度750nML,携带标记为FAM;微卫星位点FCA742,引物序列F:GTCTTGACAACGCATAAGAAC,R:ACCAGGAACACCATGTTG;产物范围114-160bp,引物终浓度130nML,携带标记为HEX;微卫星位点FCA734,引物序列F:GTTTTCTATCTTTCTGTATTGCTAG,R:GAGGGGTCAGGACTTTAAC;产物范围175-199bp,引物终浓度110nML,携带标记为HEX;微卫星位点F42,引物序列F:CAGCTCAGCACAGTGCTAC,R:AACTGCACAAATTAAGAGGC;产物范围241-269bp,引物终浓度100nML,携带标记为HEX;微卫星位点F141,引物序列F:CTTGGTTGAGTATAGAGGTAAAAG,R:AGTTACACCCATTCAAGTATG;产物范围290-349bp,引物终浓度200nML,携带标记为HEX;微卫星位点FCA730,引物序列F:AGTGGATGGAGCATTCG,R:ACTCCATATTTGTTATAGGACG;产物范围383-413bp,引物终浓度120nML,携带标记为HEX;微卫星位点FCA744,引物序列F:ATTCACGAAGTGGTATCACG,R:CTACAGCCTACTTGAAGATTGT;产物范围442-466bp,引物终浓度100nML,携带标记为HEX;微卫星位点FCA749,引物序列F:GCAGTGATTCCTTCAGACTG,R:AAGAGCATGCGTTCTCTG;产物范围84-254bp,引物终浓度120nML,携带标记为ROX。微卫星位点FCA441,引物序列F:GGTTAGTGGGTGTGCTTG,R:CATCAGCACTCTCAAAAATC;产物范围301-329bp,引物终浓度220nML,携带标记为HEX;微卫星位点FCA733,引物序列F:TAGGCTCCTCTAGGTTTACTG,R:GGTTTGTGTGTTTGGGTTAG;产物范围347-443bp,引物终浓度120nML,携带标记为ROX;微卫星位点AMEL,引物序列F:TTCCCCTCYATAAAAGCTACC,R:SAGGAGAAACTGAGTCAGAGA;产物范围258-279bp,引物终浓度120nML,携带标记为ROX。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 沈阳农业大学 用于猫个体识别和亲子鉴定的微卫星标记引物组及其15-plex快速分型检测方法

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