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申请/专利权人:陕西省中医药研究院;郴州市食品药品检验检测中心;陕西科技大学
摘要:本发明提供一种远志叶片原生质体的制备方法及瞬时转化方法。远志叶片原生质体的制备方法包括:S1、取水培远志真叶叶片,去掉表皮,得到叶肉细胞;S2、将叶肉细胞放入酶解液A中,并去除空气,进行酶解;S3、将酶解后的酶解液A离心,得远志叶片原生质体。瞬时转化方法包括:S10、将远志叶片原生质体制备成细胞悬浮液,在冰上孵育,向细胞悬浮液中加入供试质粒,室温孵育,得到细胞转化液;S20、将细胞转化液中的细胞洗涤得到转化细胞;S30、向转化细胞中加入试剂B,将转化细胞遮光孵育15h‑18h。本发明方法不仅对远志叶片原生质体分离效果好,而且整体操作时间短,制备得到的原生质体活性好、数目多、转化率高。
主权项:1.一种远志叶片原生质体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、取水培远志真叶叶片,去掉远志真叶叶片表皮,得到叶肉细胞;S2、将叶肉细胞放入酶解液A中,并去除酶解液A中的空气,然后进行酶解;S3、将S2中酶解后的酶解液A进行离心,得到远志叶片原生质体。
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