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申请/专利权人：四川农业大学

摘要：本发明提供了一种热激蛋白Hsp70基因检测抗药性的捕食螨种群的方法，热激蛋白Hsp70基因的核苷酸序列和氨基酸序列如SEQIDNO:1‑2所示，该方法为：将无抗药性的药剂敏感捕食螨种群和待测捕食螨种群在温度为41℃的培养箱中热处理6h后，以敏感捕食螨种群为对照，分别提取药剂敏感捕食螨种群和待测捕食螨种群的RNA，反转录成cDNA，用引物Hsp70‑2F和引物Hsp70‑2R对cDNA进行RT‑PCR扩增，对比药剂敏感捕食螨种群和待测捕食螨种群的热激蛋白Hsp70基因相对表达量，判断待测捕食螨种群是否为抗药性捕食螨种群。本发明利用热激蛋白Hsp70基因检测抗药性捕食螨种群，为科学合理利用捕食螨进行生物防治提供基础。

主权项：1.一种热激蛋白Hsp70基因检测抗药性的捕食螨种群的方法，其特征在于，所述热激蛋白Hsp70基因的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示，氨基酸序列如SEQIDNO:2所示；该方法为：S1、将药剂敏感捕食螨种群和待测捕食螨种群在温度为41℃的培养箱中热处理6h后，以所述药剂敏感捕食螨种群为对照，分别提取所述药剂敏感捕食螨种群和所述待测捕食螨种群的RNA，反转录成cDNA，分别得到药剂敏感捕食螨种群的cDNA和待测捕食螨种群的cDNA；S1中所述敏感捕食螨种群和待测捕食螨种群中的捕食螨为加州新小绥螨；S2、用引物Hsp70-2F和引物Hsp70-2R对S1中得到的敏感捕食螨种群的cDNA和待测捕食螨种群的cDNA进行RT-PCR扩增，对比敏感捕食螨种群和待测捕食螨种群的热激蛋白Hsp70基因相对表达量，若所述待测捕食螨种群和所述敏感捕食螨种群的热激蛋白Hsp70基因的表达量的比值＞7，则所述待测捕食螨种群为抗药性捕食螨种群；S2中所述抗药性捕食螨种群的抗药性的药物为哒螨灵；所述RT-PCR扩增的反应体系为：2×ChamQUniversalSYBRqPCRMasterMix5μL、引物Hsp70-2F1μL、引物Hsp70-2R1μL、cDNA1μL、ddH2O2μL；所述RT-PCR扩增的程序为：95℃预变性30sec；95℃变性5sec，60℃退火延伸30sec，39个循环；所述引物Hsp70-2F的核苷酸序列如SEQIDNO:3所示；所述引物Hsp70-2R的核苷酸序列如SEQIDNO:4所示。

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