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申请/专利权人：上海市农业科学院
摘要：本发明的兰州百合原生质体分离纯化及应用，将丝状的兰州百合叶片投入酶解液中酶解2‑5h后，加入等体积的1×CPW溶液终止酶的反应；酶解液为含0.4molL甘露醇、0.5‑2mv%纤维素酶和0.5‑1mv%离析酶的CPW溶液；再用75μm的细胞筛过滤，将原生质体释放至圆底管中，离心去除上清，用CPW溶液重悬原生质体；吸取原生质体悬浮液，缓慢滴入添加含蔗糖20‑28mv%的CPW溶液中，离心后吸出中间层的原生质体。其通过从兰州百合的生长状态、酶的添加量、酶解时间、纯化方式、渗透压浓度等多个维度，提高原生质体的分离效率和活性；所得原生质体可有效的应用于瞬时转化和体细胞融合。
主权项：1.兰州百合原生质体分离纯化，其特征在于，包括以下步骤；S1、将丝状的兰州百合叶片投入酶解液中酶解2-5h后，加入等体积的1×CPW溶液终止酶的反应；所述酶解液为含0.2-0.5molL甘露醇、0.5-2mv%纤维素酶和0.5-1mv%离析酶的CPW溶液；S2、用75μm的细胞筛过滤，将原生质体释放至圆底管中，离心去除上清，用CPW溶液重悬原生质体；S3、吸取原生质体悬浮液，缓慢滴入添加含蔗糖20-28mv%的CPW溶液中，离心后吸出中间层的原生质体。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 上海市农业科学院 一种兰州百合叶肉原生质体的分离纯化方法
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