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一种抗夜来香花叶病毒的弱毒疫苗R181E及其应用 

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申请/专利权人:海南大学

摘要:本发明属于生物技术领域,提供了一种抗夜来香花叶病毒的弱毒疫苗R181E及其应用,以TelMV侵染性克隆质粒pPasFru为模板,以HCPro‑F、HCPro‑R、HCProE‑R和HCProE‑F为引物,使用Phusion高保真DNA聚合酶进行扩增,获得大小分别为1278bp和117bp的ab和cd片段,再以ab和cd片段的混合物为模板,获得大小为1359bp的ad片段,再进行PstI、SalI双酶切和连接反应,反应产物转化大肠杆菌DH10B,使HCPro的第181位精氨酸突变为谷氨酸,获得弱毒突变体pPasFru‑R181E;本发明通过将TelMVHCPro蛋白的第181位精氨酸突变为谷氨酸,获得弱毒疫苗,弱毒疫苗接种百香果植株后不表现症状但病毒含量仍较高,该弱毒疫苗作用稳定,可以起到有效的交叉保护作用,为田间防控TelMV提供新疫苗。

主权项:1.一种弱毒疫苗R181E,其特征在于:以TelMV侵染性克隆质粒pPasFru为模板,以HCPro-F、HCPro-R、HCProE-R和HCProE-F为引物,使用Phusion高保真DNA聚合酶进行扩增,获得大小分别为1278bp和117bp的ab和cd片段,再以ab和cd片段的混合物为模板,获得大小为1359bp的ad片段,再进行PstI、SalI双酶切和连接反应,反应产物转化大肠杆菌DH10B,使HCPro的第181位精氨酸突变为谷氨酸,获得弱毒突变体pPasFru-R181E。

全文数据:

权利要求:

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