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申请/专利权人：成都生物制品研究所有限责任公司

摘要：本发明提供了一种肺炎链球菌荚膜多糖的纯化方法，由如下步骤组成：向肺炎链球菌菌液中加入脱氧胆酸钠杀菌，调pH至酸性沉淀得到上清液，超滤后加入CTAB沉淀，取上清液或收集沉淀加入盐溶液得重悬液，再加入碘化钠沉淀去除残余CTAB，超滤后获得纯化多糖。本发明方法步骤精减，多糖回收率高，杂质含量低，纯化效果优异，环境友好，适于产业化，具有很好的推广应用价值。

主权项：1.一种纯化肺炎链球菌荚膜多糖的方法，其特征在于，由如下步骤组成：（1）向肺炎链球菌菌液中加入脱氧胆酸钠杀菌，再降温并调节pH至不高于4.5，在2~8℃静置沉淀后除去沉淀得上清液，超滤得超滤液；所述加入脱氧胆酸钠的终浓度为0.1~0.5%wv；所述加入脱氧胆酸钠杀菌是在：20~30℃静置1h~24h；所述降温为降温至不超过15℃；所述肺炎链球菌为1型、3型、5型、6A型、6B型、9V型、19A型、19F型或23F型，所述加入脱氧胆酸钠的终浓度为0.1~0.2%wv；或，所述肺炎链球菌为4型、7F型、14型或18C型，所述加入脱氧胆酸钠的终浓度为0.3~0.5%wv；所述肺炎链球菌为1型、3型或6A型，所述调节pH是调节pH至4.5；或，所述肺炎链球菌为6B型、7F型、9V型、14型、18C型、19A型、19F型或23F型，所述调节pH是调节pH至4.4；或，所述肺炎链球菌为4型或5型，所述调节pH是调节pH至4.2；所述肺炎链球菌为1型、5型、6A型、6B型、7F型、9V型、14型、19A型、19F型或23F型，所述静置沉淀是在2~8℃下静置1~5h；或，所述肺炎链球菌为3型、4型、18C型，所述静置沉淀是在2~8℃下静置5~24h；（2）向超滤液中加入中性磷酸盐缓冲液及CTAB反应产生沉淀后，收集上清液得到待处理混合液，或收集沉淀加入盐溶液重悬后获取上清液得到待处理混合液；所述肺炎链球菌为7F型、14型或23F型肺炎链球菌，所述待处理混合液为收集的上清液；或，所述肺炎链球菌为1型、3型、4型、5型、6A型、6B型、9V型、18C型、19A型或19F型，所述待处理混合液为：沉淀加入盐溶液重悬后获取的上清液；所述加入中性磷酸盐缓冲液的终浓度为0.01~0.10molL；所述加入CTAB的终浓度为0.2~2.0%wv；所述肺炎链球菌为1型、3型、6A型、7F型、9V型、14型或18C型，所述中性磷酸盐缓冲液为：pH为6.0~7.0的磷酸盐缓冲液；或，所述肺炎链球菌为4型、5型、6B型、19A型、23F型，所述中性磷酸盐缓冲液为：pH为7.0~8.0的磷酸盐缓冲液；或，所述肺炎链球菌为19F型，所述中性磷酸盐缓冲液为：pH为6.6~7.4的磷酸盐缓冲液；所述肺炎链球菌为1型、4型、5型、6A型、6B型、9V型、18C型、19A型或19F型，所述盐溶液为浓度为0.1~0.3molL的氯化钠水溶液；或，所述肺炎链球菌为3型，所述盐溶液为浓度为0.3~0.5molL的氯化钠水溶液；（3）向待处理混合液中加入碘化钠产生沉淀，除去沉淀，超滤后即得纯化的肺炎链球菌荚膜多糖溶液。

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