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申请/专利权人：武汉商学院
摘要：一种高效获得春兰转基因苗的方法，以春兰类原球茎作为外植体，置于预培养基中进行预培养7天，预培养后在外植体表面划出切口，置于含有转化载体的农杆菌菌液中进行农杆菌侵染，侵染完成后，置于共培养基上暗培养5天；暗培养完成后采用固液固交替培养方式进行筛选培养；固液固交替培养具体为，先转移至固体筛选培养基中培养5天，然后转移至液体筛选培养基中光照振荡培养18‑28天直至开始分化出幼苗雏形，再转移至固体筛选培养基中培养7‑10天直至分化出绿色完整幼苗。本设计能够将春兰从类原球茎分化为完整幼苗的时间由原本3‑6个月缩短至55‑65天，大大缩短春兰外植体分化成苗的时间，并且具有高分化率和转化效率，保证了稳定转化。
主权项：1.一种高效获得春兰转基因苗的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：S1、以春兰类原球茎作为外植体，将外植体置于预培养基中进行预培养7天；S2、在预培养后的外植体表面划出切口，将其置于含有转化载体的农杆菌菌液中进行农杆菌侵染，将农杆菌侵染完成后的外植体置于共培养基上进行暗培养5天；S3、将暗培养完成后的外植体进行筛选培养，分化得到绿色幼苗，计算幼苗分化率；其中，所述筛选培养采用固液固交替培养方式，具体步骤为：将暗培养完成后的外植体先转移至固体筛选培养基中培养5天，然后转移至液体筛选培养基中光照培养18-28天，分化出幼苗雏形时转移至固体筛选培养基中培养10天。
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百度查询： 武汉商学院 一种高效获得春兰转基因苗的方法
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