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申请/专利权人：浙江大学
摘要：本公开提供一种通过靶向敲除基因建立的早衰细胞模型及其sgRNA、构建方法和应用，采用双sgRNA靶向敲除法，在GDF11基因的第二个外显子以及其上游的内含子序列中同时产生两个DNA双链断裂点，针对GDF11基因的第二个外显子上的两个位点进行切割，敲除效率高，同时鉴定手段简单且鉴定效率高，只需PCR扩增和电泳即可确定是否敲除成功，大大降低了敲除后的鉴定成本；建立了GDF11基因敲除的神经母瘤细胞系即Neuro‑2a细胞系，为探究内源性GDF11的生物学功能提供了体外细胞模型，基于实验结果首次发现敲除GDF11基因的Neuro‑2a细胞系具有衰老表征，为衰老领域的研究提供了研究工具，促进抗衰老课题的研究，为延缓衰老提供研究基础。
主权项：1.一种敲除GDF11基因的Neuro-2a细胞系在制备神经元细胞衰老的疾病模型中的应用，其特征在于，包括利用CRISPRCas9系统敲除Neuro-2a细胞系的GDF11基因，所述CRISPRCas9系统使用靶向敲除GDF11基因的双sgRNA；其中，所述双sgRNA，包括GDF11-sgRNA1和GDF11-sgRNA2；所述GDF11-sgRNA1的靶向序列为：GCCGAAGGTACACCCACAGT，所述GDF11-sgRNA2的靶向序列为：GAACCGGGTAAGGTAGCTTG。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 浙江大学 一种通过靶向敲除基因建立的早衰细胞模型及其sgRNA、构建方法和应用
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