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申请/专利权人：北京市生态环境保护科学研究院

摘要：本发明公开了一种基于蚯蚓毒性测试评估苯并[a]芘土壤生态风险的方法，其技术方案要点是提供了一种以蚯蚓为生态受体进行实地测试的苯并[a]芘土壤生态风险评估的方法，其能够在苯并[a]芘生态毒性数据不足的前提下，基于主要污染为苯并[a]芘的研究区域采集的土壤样品及研究区域附近无苯并[a]芘的土壤样品进行蚯蚓的回避测试及致死测试，以研究区域土壤的蚯蚓回避率和蚯蚓致死率为依据，对主要污染为苯并[a]芘的研究区域进行苯并[a]芘土壤生态风险的评估，无需大量的苯并[a]芘生态毒性数据。

主权项：1.一种基于蚯蚓毒性测试评估苯并[a]芘土壤生态风险的方法，其特征在于：包括如下步骤：S1、采集研究区域的土壤样品作为待评估土壤，研究区域的主要污染为苯并[a]芘；采集研究区域附近无苯并[a]芘的土壤样品作为洁净土壤；S2、选择多条体重为300-600mg、环带明显、大小基本一致的蚯蚓，恒温无光照条件下进行驯化，蚯蚓驯化后在恒温无光照条件下进行清肠处理，选择多条清肠后仍然健康的蚯蚓作为测试蚯蚓；S3、获取蚯蚓回避率：回避测试：选择一块挡板插入生化培养盒中，将生化培养盒内分成体积相等的第一分室和第二分室，第一分室填充洁净土壤，第二分室填充待评估土壤，第一分室和第二分室中的土壤质量相等；将挡板抽出，在挡板抽走留下的缝隙中放置至少10条测试蚯蚓，轻弹生化培养盒外壁使缝隙两边的土壤落下将测试蚯蚓盖住，再用透气顶盖盖住生化培养盒顶部开口；在恒温且光照与黑暗时间比为1：1的环境中培养至少48h；培养结束后，将挡板原位插回，阻断测试蚯蚓在两分室中的自由迁移，然后将第一分室和第二分室中的土壤分别取出，分别统计洁净土壤与待评估土壤中的蚯蚓数量，若蚯蚓被挡板切为两半，则不管蚯蚓残体的长度如何，均被分别记为0.5条；回避测试重复多次；基于多次回避测试的结果，计算蚯蚓回避率；蚯蚓回避率AR计算公式为：其中，N0表示洁净土壤中的蚯蚓数量，单位为条；Ni表示待评估土壤中的蚯蚓数量，单位为条；N表示进行回避测试的蚯蚓总数，等于N0和Ni之和，单位为条；AR表示待评估土壤的蚯蚓回避率，用％表示；获取蚯蚓致死率：致死测试：将至少10条蚯蚓放置在仅填充待评估土壤的生化培养盒中，用透气顶盖盖住生化培养盒顶部开口，在温度、湿度及光照强度恒定的条件下，培养至少7天，培养期间不向蚯蚓提供食物；以蚯蚓前尾部对机械刺激具有反应为存活标准，记录培养结束后，将生化培养盒内的土壤取出，统计待评估土壤中存活的蚯蚓数量；致死测试重复多次，基于多次致死测试的结果计算蚯蚓致死率LR；蚯蚓致死率LR计算公式为，其中，S0表示进行致死测试的蚯蚓总数，单位为条；Si表示培养结束后待评估土壤中存活的蚯蚓数量，单位为条；LR表示待评估土壤的蚯蚓致死率，用％表示；S3、给定阈值A和阈值B，A小于或等于10％，B小于或等于10％；若AR＜A，则表示待评估土壤生态风险低，待评估土壤可直接生态利用；若LR≥B，则表示待评估土壤生态风险高，待评估土壤不可开展生态利用；若AR≥A且LR＜B，则表示待评估土壤生态风险为中度，待评估土壤经生态修复后可开展生态利用。

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