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申请/专利权人：广东环凯生物科技有限公司;广东环凯信息科技有限公司;广州环凯实验室科技有限公司;上海环凯生物科技有限公司

摘要：本发明属于微生物分子检测领域，公开了一种同时检测多种致病菌的多重qPCR试剂盒及方法。发明人针对沙门氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌和阪崎克罗诺杆菌基因组各自的新特异性基因片段以及大肠埃希氏菌O157:H7特异性较高的rfbE基因，优化设计得到的多重qPCR引物探针组具有很高的特异性，仅对四种目标菌在特异性的荧光信号通道检测出现荧光信号，检测结果更加准确。本发明的多重qPCR检测试剂盒10h内即可完成单管内四种致病菌的高灵敏度检测，其中qPCR全过程仅需约1h，检测灵敏度可低至1.9～12CFUTest，显著提高了检测效率、降低了检测成本，特别适用于大规模样品的摸底排查和实际检测。

主权项：1.一种同时检测多种致病菌的多重qPCR引物探针组，其特征在于，包括：用于沙门氏菌检测的引物对，包括Sal-2F：TTCTCAATGCCGCTCAAAAGT和Sal-2R：ATCGCTTTCAACCAAATAGTGATG；用于阪崎克罗诺杆菌检测的引物对，包括ES-1F：CGCCGTTTCCAGTACGTTACC和ES-1R：CTTCGTTGCCGCTGCCATAG；用于单核细胞增生李斯特氏菌检测的引物对，包括Lister-2F：GAGACAGCACCATTTCCGAAC和Lister-2R：ATCCCAATCTTCCTAACCACTGT；用于大肠埃希氏菌O157:H7检测的引物对，包括O157-1F：CCTTGCAGATAAACTCATCGAAACAA和O157-1R：CCTCAGCTATAGGGTGCTTTTGATATT。

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