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申请/专利权人:武汉大学
摘要:本发明属于生物技术领域,涉及一种具有抗肿瘤免疫增强效应的抗体‑金属改造外泌体及其制备方法和应用。本发明将Mn2+引入纯生物源性的外泌体递送系统,创新了相关递送载体的构建形式;本发明利用外泌体递送进行药物递送,提高药物的肿瘤渗透;引入Mn2+与PDL1Nb、DOX协同生效,三位一体提升疗效并减弱系统毒性。采用本发明方法改造后的外泌体具有良好的杀伤肿瘤、诱导ICD与激活cGAS‑STING促进免疫激活的功能效应。
主权项:1.一种具有抗肿瘤免疫增强效应的抗体-金属改造外泌体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:将含有PDL1靶向蛋白的纳米抗体片段的膜锚定蛋白转染进入HEK-293T细胞,表达蛋白后提取得到PDL1Nb-GFP-TRPPK1融合蛋白改造的细胞膜;所述含有PDL1靶向蛋白的纳米抗体片段的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示;所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示;将MnCl2溶液与细胞膜共孵育,得到结合有Mn2+的膜成分初产物,将结合有Mn2+的膜成分初产物滴加入胞膜成分后进行二次包覆,得到抗体-Mn2+改造的细胞膜;将抗体-Mn2+改造的细胞膜加入脂质体挤出仪中,收集挤出液,冷冻离心后得到改造外泌体αPDL1@Mn2+,再采用电穿孔方法装载DOX,得到抗体-金属改造外泌体αPDL1@DOX-Mn2+。
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权利要求:
百度查询: 武汉大学 一种具有抗肿瘤免疫增强效应的抗体-金属改造外泌体及其制备方法和应用
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