买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

申请/专利权人：中国海洋大学;河北省农林科学院生物技术与食品科学研究所

摘要：本发明属于食品检测技术领域，具体涉及一种小米酸面团多酚提取及成分检测方法，包括以下步骤：S0、将小米酸面团加入至水中并进行揉搓并形成面浆，将容器中的水及小米酸面团一同进行冻干处理并形成冻干小米酸面团粉；S1、采用溶剂A提取冻干小米酸面团粉获得多酚，浓缩得到固体样品后重新溶于水相，脱脂并提纯得到游离态多酚；S2、脱脂后水解，将共轭态多酚转化为游离态多酚，然后提纯得到共轭态多酚；S3、将S1和S2中的沉淀水解、提纯后得到结合态多酚。通过本发明的提取方法可以提取可萃取多酚和不可萃取多酚，从而可以准确检测小米酸面团中的多酚含量。

主权项：1.一种小米酸面团多酚的成分检测方法，其特征在于，包括以下步骤：S0、向容器中倒入水，然后将小米酸面团加入至水中并进行揉搓并形成面浆，直至水中无结块状小米酸面团，将容器中的水及小米酸面团一同进行冻干处理并形成冻干小米酸面团粉；S1、将冻干小米酸面团粉加入至溶剂A中，离心并提取上清液得到液体样品，离心获得的残渣备用，将液体样品采用N2吹干并得到固体样品，然后将固体样品重新溶解于水相中，将水相采用脱脂剂进行脱脂并得到脱脂水相，采用萃取剂对脱脂水相进行萃取并得到水相层和有机层，将有机层采用N2吹干得到固体残留物，将固体残留物悬浮在溶剂B中，然后经过滤得到待检测游离态多酚并保存；S2、将S1中萃取得到的水相层采用NaOH进行水解，将共轭态多酚转化为游离态，并调节PH至2-4，然后再采用萃取剂进行萃取并收集有机层，将收集的有机层采用N2吹干得到固体残留物，将固体残留物悬浮在溶剂B中，然后经过滤得到待检测共轭态多酚并保存；S3、将S1中离心获得的残渣利用溶剂A进行溶解，将溶解后的溶液采用NaOH水解并调节PH至2-4，离心并提取上清液得到液体样品，将液体样品采用脱脂剂脱脂，然后采用萃取剂进行萃取并收集有机层，将收集的有机层采用N2吹干得到固体残留物，将固体残留物悬浮在溶剂B中，然后经过滤得到待检测结合态多酚并保存；所述溶剂A为甲醇体积占比为70-85%的甲醇水溶液，所述溶剂B为甲醇体积占比为40-60%的甲醇水溶液；S4、将步骤S1-S3中得到的待检测游离态多酚、待检测共轭态多酚以及待检测结合态多酚采用超高效液相色谱进行分析；S5、利用质谱仪进行扫描，将超高效液相色谱连接一级质谱和二级质谱，在负电离模式下运行，每10个样品对仪器进行一次校准，数据采集在100-1000mz的质量范围内进行，收集各成分及其碎片离子的质荷比；S6、根据步骤S4、S5获取的成分及其碎片离子的质荷比数据推断基团组成，对全谱采集数据进行处理数据库比对和标准品验证，确定各成分的物质；步骤S4中超高效液相色谱的色谱条件为：色谱柱为C18柱；进样体积为5μL；柱温45℃；流动相A为体积浓度为0.1%的甲酸水溶液，流动相B为甲醇；流动相流速为0.4mLmin；线性梯度洗脱，线性梯度洗脱程序如下：初始5%B，2min15%B，10min60%B，15min90%B，16min90%B，16.5min5%B，再保持1.5min用于平衡，总运行时间为25min；步骤S5中质谱仪的条件为：离子喷雾电压为4.5kV；源温度为500℃；离子源气体1和气体2为50psi，最大允许误差为±5ppm；累积时间为0.25s；解聚电位和碰撞能量分别设置为80V和10V；步骤S5中收集的成分为3,4-二羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸、绿原酸、香草酸、咖啡酸、丁香酸、对香豆酸、阿魏酸、芥子酸、芦丁、芹菜素、山奈酚和槲皮素。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国海洋大学 河北省农林科学院生物技术与食品科学研究所 一种小米酸面团多酚提取及成分检测方法