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一种富集泛素化蛋白的方法及富集试剂盒 

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摘要:本发明公开了一种富集泛素化蛋白的方法及富集试剂盒,该富集泛素化蛋白的方法包括如下步骤:S1、构建带有泛素基因、TEV序列和自我标记蛋白基因的泛素‑TEV‑自我标记蛋白重组质粒;S2、将带有待富集蛋白基因的质粒与重组质粒混合后,导入细胞中进行表达,以获得泛素化蛋白;S3、加入裂解液和含有自我标记蛋白相应配体的磁珠捕获泛素化蛋白;S4、加入TEV蛋白酶,离心,获得富集后的泛素化蛋白。本发明富集泛素化蛋白的方法,基于自标记蛋白和相应配体的相互作用,实现泛素化蛋白的富集,而非抗体识别,提高了检测的特异性。

主权项:1.一种富集泛素化蛋白的方法,其特征在于,包括如下步骤:S1、构建带有泛素基因、TEV序列和自我标记蛋白基因的泛素-TEV-自我标记蛋白重组质粒;S2、将带有待富集蛋白基因的质粒与重组质粒混合后,导入细胞中进行表达,以获得泛素化蛋白;S3、加入裂解液和磁珠,以捕获泛素化蛋白,所述磁珠为含有自我标记蛋白相应配体的磁珠;S4、加入TEV蛋白酶,离心,获得富集后的泛素化蛋白。

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