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摘要:本发明涉及一种靶标序列的通用检测方法及其应用。本发明的检测方法以挂锁探针的连接序列通过滚环扩增并切刻得到的序列作为信号探针,信号探针与检测体系中具有发夹结构的检测探针互补配对,从而打开发夹结构,使得位于发夹结构末端的二茂铁远离电极表面,电信号发生变化;同时,在1‑十一硫醇的作用下,电极表面形成电子阻断层,电子完成从金电极‑二茂铁‑铱酸盐的单向转移,由此实现电信号的有效放大。本发明的检测方法只需更换挂锁探针两端的检测臂即可实现对不同靶基因的检测,而无需更换检测探针,具有通用性,且本发明通过电化学整流体系实现了电信号的有效放大,具有优异的检测特异性和灵敏性。
主权项:1.一种靶标序列的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、将靶标序列与环形挂锁探针共孵育得到孵育产物,向孵育产物中加入连接酶得到环化的环形挂锁探针;所述环形挂锁探针包括与靶标序列互补配对的第一检测臂和第二检测臂以及连接所述第一检测臂和第二检测臂的连接序列,所述连接酶催化第一检测臂的5'端与第二检测臂的3'端连接;S2、以环化后的环形挂锁探针为模板进行滚环扩增得到扩增产物,向扩增产物中加入切刻酶得到信号探针;所述信号探针与所述连接序列的部分序列互补配对;所述切刻酶的识别位点位于所述扩增产物上与所述连接序列两端互补配对的序列;S3、将步骤S2中的信号探针加入含有检测探针的检测体系中进行检测。
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百度查询: 江南大学 一种靶标序列的通用检测方法及其应用
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