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摘要：本发明属于酶工程技术领域，具体涉及一种热稳定性高的末端脱氧核苷酸转移酶突变体及其应用，所述末端脱氧核苷酸转移酶突变体是在由SEQIDNO.1所示的氨基酸序列进行多点突变得到的。本发明通过对来源于Zonotrichiaalbicollis的末端脱氧核苷酸转移酶TdT野生型进行结构截断后，再进行多点突变，得到一系列具有耐热性提升的突变体，这些突变体在具有更好的热稳定性以及更高的解折叠温度，在DNA酶法合成方面可以发挥重要的作用。

主权项：1.一种热稳定性高的末端脱氧核苷酸转移酶突变体，其特征在于，为下述突变形式为如下所示形式中的一种：1由SEQIDNO.2所示氨基酸序列进行S116AP301AL50VF40RC173WA257CV70FN192EL166QA322RQ104LY17HS57TN91KI39GE84HR89EK35NK11RI82LG346TE43AY302FV27IV164IS7AR338TI232QV360IR340KN170EL45RK339QK100QI197VE79Q突变得到，氨基酸序列如SEQIDNO.3所示；2由SEQIDNO.2所示氨基酸序列进行S116AP301AL50VF40RC173WA257CV70FN192EL166QA322RQ104LY17HS57TN91KI39GE84HR89EK35NK11RI82LG346TE43AY302FV27IV164IS7AR338TI232QV360IR340KN170EL45RK339QK100QI197VE79QV237DS139TQ73HQ240KL147QK20RE239SD358E突变得到，氨基酸序列如SEQIDNO.4所示；3由SEQIDNO.3所示氨基酸序列进行G314NQ232II328LE275KI183MD76R突变得到；4由SEQIDNO.3所示氨基酸序列进行G314NQ232II328LE275KI183MD76RT270NR311KM28LE92RA101T突变得到；5由SEQIDNO.3所示氨基酸序列进行G314NQ232II328LE275KI183MD76RT270NR311KM28LE92RA101TV237ET174AQ240KK20RF297WD358EC271Y突变得到；6由SEQIDNO.4所示氨基酸序列进行G314NE361PQ232I突变得到；7由SEQIDNO.4所示氨基酸序列进行G314NE361PQ232II183M突变得到；8由SEQIDNO.4所示氨基酸序列进行G314NE361PQ232II183MI328L突变得到；9由SEQIDNO.4所示氨基酸序列进行G314NE361PQ232II183MI328LN31Y突变得到；10由SEQIDNO.4所示氨基酸序列进行G314NE361PQ232II183MI328LN31YE275KD76R突变得到；11由SEQIDNO.4所示氨基酸序列进行G314NE361PQ232II183MI328LN31YE275KD76RR311KI288VC271YT174AK91EF297YE92RE278DI294V突变得到，氨基酸序列如SEQIDNO.5所示。

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百度查询： 浙江大学 一种热稳定性高的末端脱氧核苷酸转移酶突变体及其应用