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摘要:本发明公开提供了一种活体水母毒素蛋白的粗纯方法,属于海洋生物技术领域。本发明通过覆网淀粉凝固体诱导水母防御和捕猎行为,使水母的刺丝囊脱落并粘附到覆网淀粉凝固体中,对水母损害小,其再生时间短,仅需2天,实现了循环收集水母刺丝囊的目的,生产可持续性极具优势;使用酶法分解淀粉凝固体的时间较水母自溶时间更短,利于缩短生产时间;收集的刺丝囊及其毒素,受外界蛋白污染可能性小,初步纯化分离出的蛋白仅为水母毒素蛋白,为后续进一步纯化创造良好的基础。
主权项:1.一种活体水母毒素蛋白的粗纯方法,其特征在于,包括以下步骤:1使用覆网淀粉凝固体靠近成年水母,诱导成年水母对所述覆网淀粉凝固体进行防御和捕猎行为一段时间,回收覆网淀粉凝固体;2采用纯化水对步骤1回收的覆网淀粉凝固体冲洗、剥去网后,切块、水冷粉碎,得到淀粉凝固体粉末;3向步骤2得到的淀粉凝固体粉末中加入纯化水溶解,滴加碘水,使用低温a-淀粉酶,于0~4℃条件下酶解至溶液呈无色,获得酶解液;4对步骤3得到的酶解液进行冷冻离心,收集下层沉淀,用干净海水洗涤2-3次后,再次冷冻离心,收集下层沉淀,即得到水母刺丝囊细胞;5采用组织研磨器对步骤4得到的水母刺丝囊细胞进行研磨破碎后,冷冻离心,收集上层液,即为水母毒素蛋白粗纯液。
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