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摘要:本申请适用于生物技术领域,提供了一种一步法全血基因组DNA提取试剂及其应用,包括裂解结合液、蛋白酶K、磁珠、洗涤液Ⅰ、洗涤液Ⅱ和洗脱液;其中,裂解结合液包含Tris‑HCl、乙二胺四乙酸、NaCl、盐酸胍、TritonX‑100、Tween‑20、异丙醇;洗涤液Ⅰ为Tris‑HCl、乙二胺四乙酸、NaCl、盐酸胍、Tween‑20;洗涤液Ⅱ包括Tris‑HCl和无水乙醇;洗脱液包括Tris‑HCl、乙二胺四乙酸;本申请试剂配合自动化提取设备,可一步法实现从复杂人体血液样本中灵活通量提取出高浓度、高纯度的基因组DNA,且该体系兼容性佳,适用于外周血和骨髓血,同时具有快速、简单易操作等优势。
主权项:1.一种一步法全血基因组DNA提取试剂,其特征在于,所述全血基因组DNA提取试剂包括裂解结合液、蛋白酶K、磁珠、洗涤液Ⅰ、洗涤液Ⅱ和洗脱液;其中,所述裂解结合液包含Tris-HCl、乙二胺四乙酸、NaCl、盐酸胍、TritonX-100、Tween-20和异丙醇;所述洗涤液Ⅰ为Tris-HCl、乙二胺四乙酸、NaCl、盐酸胍、Tween-20;所述洗涤液Ⅱ包括Tris-HCl和无水乙醇;所述洗脱液包括Tris-HCl、乙二胺四乙酸;所述裂解结合液中,Tris-HCl的浓度为50mmolL,乙二胺四乙酸的浓度10mmolL,NaCl的浓度为0.4molL,盐酸胍的浓度为4molL,TritonX-100浓度为3%,Tween-20浓度为1%,异丙醇浓度为60%,调节裂解结合液pH为8;所述洗涤液Ⅰ中,Tris-HCl的浓度为100mmolL,乙二胺四乙酸的浓度为20mmolL,NaCl的浓度为0.125molL,盐酸胍的浓度为3molL,Tween-20的浓度为1%,调节洗涤液Ⅰ的pH为7.6;所述洗涤液Ⅱ中,Tris-HCl的浓度为200mmolL,无水乙醇的浓度为80%;所述磁珠为包裹有氧化硅的四氧化三铁纳米颗粒,浓度为20mgml。
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