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摘要:本发明提供了一种CRISPRCas12a体系可视化检测食源性致病菌的方法,包括如下步骤:(1)通过RAA等温扩增技术对食源性致病菌的特定基因进行扩增;(2)在crRNA的介导下,Cas12a能够特异性识别和切割目的靶标,并激活反式切割活性,从而切割两端修饰有β‑半乳糖苷酶和琼脂糖微球的ssDNA;(3)利用滤芯枪头,将游离的β‑半乳糖苷酶过滤至枪头底部;(4)β‑半乳糖苷酶催化氯酚红‑β‑D‑吡喃半乳糖苷溶液,产生颜色变化,由此实现对于食源性致病菌的检测。该方法操作简便,成本低廉,不需要使用大型仪器,且灵敏度高、特异性好,具有一定的应用前景。
主权项:1.CRISPRCas12a体系可视化检测食源性致病菌的方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤一:借助RAA核酸扩增技术对食源性致病菌的特定基因进行扩增;步骤二:在crRNA的介导下,Cas12a能够特异性识别和切割目的靶标,并激活反式切割活性,从而切割两端修饰有β-半乳糖苷酶和琼脂糖微球的ssDNA,释放出β-半乳糖苷酶;步骤三:利用滤芯枪头,将游离的β-半乳糖苷酶过滤至枪头底部;步骤四:β-半乳糖苷酶催化枪头底部中的氯酚红-β-D-吡喃半乳糖苷溶液,产生颜色变化,由此实现对于食源性致病菌的检测。
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百度查询: 杭州孚斯泰生物技术有限公司 一种CRISPR/Cas12a体系可视化检测食源性致病菌的方法
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