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摘要：本发明公开了一种基于聚集诱导发光比率荧光探针的ELISA检测方法，比率荧光探针包括红色和绿色的AIE荧光微球。将红色AIE微球偶联抗原，绿色荧光微球偶联生物素或地高辛抗体，ELISA包被抗体和链霉亲和素或地高辛全抗原。在ELISA反应体系中，红色AIE荧光微球偶联的抗原与ELISA上的抗体结合，在610nm处发出红色荧光，读值记为R；绿色AIE荧光微球偶联的生物素与ELISA板上的链霉亲和素结合或地高辛抗体与地高辛全抗原结合，在501nm处发出绿色荧光，读值记为G。通过计算RG的值可以定量检测目标物浓度。本发明通过自校准将外部干扰降至最低，同时省去使用酶标二抗催化显色不稳定以及ELISA自身繁琐的步骤，为解决传统ELISA方法操作繁琐且易出现背景干扰等问题提供新技术和新思路。
主权项：1.一种基于聚集诱导发光比率荧光探针的ELISA检测方法，其特征在于：所述比率荧光探针包括红色AIE荧光微球RAIENPs和绿色AIE荧光微球GAIENPs两种颜色AIE荧光微球制备成的探针；所述RAIENPs和GAIENPs的激发波长同为360nm、发射波长分别为501nm和610nm，发射峰无交叠；所述ELISA检测方法步骤为：所述RAIENPs偶联抗原RAIENPs@Antigen或标记抗体RAIENPs@HBVmAbs，所述GAIENPs偶联生物素或地高辛抗体GAIENPs@Bio或GAIENPs@DigmAbs，所述ELISA包被抗体和链霉亲和素SA或地高辛全抗原Dig-BSA；所述RAIENPs@Antigen或RAIENPs@HBVmAbs与ELISA上的抗体结合，在610nm处发出红色的荧光，读值记为R；所述GAIENPs@Bio与ELISA板上的SA结合或GAIENPs@DigmAbs与Dig-BSA结合，在501nm处发出绿色荧光，读值记为G；通过计算RG的值定量检测目标物浓度；制备红色AIE荧光微球的红色AIE分子RAIE的结构式为： 制备绿色AIE荧光微球的绿色AIE分子GAIE的分子式为： 。
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百度查询： 南昌大学 一种基于聚集诱导发光比率荧光探针的ELISA检测方法
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