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摘要:本发明涉及细胞工程技术领域,具体涉及一种胃癌类器官与功能性人类胃肠道类器官共培养模型的构建方法。本发明所公开的方法通过显微注射设备将胃癌类器官注射至功能性人类胃肠道类器官的黏膜层一侧的空腔中,构建了体外胃癌肿瘤浸润模型,体外精确模拟了胃癌侵袭过程,提供了胃癌侵袭的可观测平台及干预平台。本发明所公开的构建方法,缩短类器官解离剂消化时间,仅分离基质胶和类器官,未将胃癌类器官和功能性人类胃肠道类器官消化成单细胞,保留类器官3D结构,发挥类器官模拟机体的优势。本发明所公开的共培养体系更适合精准医疗,有助于预测药物反应,预测患者复发转移风险及预后。
主权项:1.一种胃癌类器官与功能性人类胃肠道类器官共培养方法,其特征在于,具体包括以下步骤:步骤1.胃癌类器官培养;步骤2.功能性人类胃肠道类器官培养;步骤3.胃癌类器官和功能性人类胃肠道类器官共同培养:(1)收集步骤1所得的成熟的胃癌类器官,用类器官专用解离剂消化,离心,弃胶,以1×104个mL的密度重悬于DMEMF12基础培养基中;(2)将步骤2得到的功能性人类胃肠道类器官接种在胶滴中,置于37℃孵箱中10min;(3)在无菌工作台内,用内径大于0.1mm的玻璃显微注射针吸取步骤2中胃癌类器官悬液,将其加载到显微注射设备上;(4)在立体显微镜下将(3)吸取的胃癌类器官悬液注射至(2)所得的功能性人类胃肠道类器官的黏膜层一侧的空腔中,并加入共培养专用培养基,每3天更换。
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百度查询: 中国医科大学附属第一医院 一种胃癌类器官与功能性人类胃肠道类器官共培养模型的构建方法
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