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申请/专利权人:贵州省山地资源研究所
摘要:本发明公开了一种米槁CinnamomummigaoH.W.Li组织培养方法,属木本植物无性繁殖技术领域,具体包括消毒方式、诱导培养、增殖培养、生根培养、炼苗移栽,选取当年生性状优良的米槁半木质化枝条,修剪成带腋芽的茎段,经消毒接种到诱导培养基中,获得无菌外植体,在光照条件培养下形成愈伤组织和不定芽,再将其接种到增殖培养基中诱导扩繁,后转接至生根培养基中生根,炼苗移栽。本发明取材方便,减少育苗时间,能解决米槁资源短缺的现状,为工厂化生产提供理论支持。
主权项:1.一种米槁组织培养方法,其特征在于:包括步骤如下:a.取当年生米槁半木质化枝条,修剪成2-3cm带有腋芽的茎段为外植体,置于洗洁精水中浸泡,用牙刷刷洗,流水冲洗;b.在超净工作台中,将处理好的外植体浸泡于75%的酒精中30s,再用0.1%的HgCl2消毒6min30s-9min,最后用无菌水冲洗3-5次,获得无菌外植体,在无菌培养皿上切除两段变黑部分,备用;c.将处理好的外植体接种到诱导培养基MS+6-BA1.0-3.0mgL+IBA0.1-0.3mgL+琼脂6.5gL+蔗糖30gL中,培养基pH值调到5.8,培养条件为光培养,培养30d后获得无菌的愈伤组织和不定芽;d.将无菌不定芽转接到增殖培养基MS+6-BA0.1-3.0mgL+IBA0.1-0.3mgL+NAA0.2-0.4mgL+活性炭0.5-3gL+琼脂6.5gL+蔗糖30gL,pH值调到5.8,培养条件为光培养,培养30d,获得米槁增殖组培苗;e.选择经增殖培养后长势良好、高2.5cm以上的不定芽转接种生根培养基12MS+IBA0.1-3.0mgL+NAA0.1-1.0mgL+活性炭0-0.5gL+琼脂7gL+蔗糖30gL上,培养基pH值为5.8,培养条件为光培养。f.选择生根2-3条、叶片5~7片的组培苗进行炼苗处理,在闭瓶条件下,接受室温和自然光3-5d,再打开瓶盖炼苗5d,使其逐步适应外部生长环境;炼苗后,用镊子取出米槁组培苗,在自来水下将基部琼脂冲洗干净之后进行移栽,移栽基质选用沙子+珍珠岩、或泥炭土+珍珠岩、或泥炭土+沙子三种基质处理。
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