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基于CRISPR/Cas9的胃癌相关LncRNA HOXA10的检测试纸条方法及其应用 

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申请/专利权人:安徽医科大学

摘要:本发明涉及生物医学技术领域,提供了临床样品中胃癌相关LncRNAHOXA10的快速检测方法,所述针对胃癌相关LncRNAHOXA10特异性的引物对分别如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示,所述CRISPRCas9包括Cas9蛋白和sgRNA,所述sgRNA序列如SEQIDNO.3所示,所述金探针序列如SEQIDNO.4所示,所述侧向流层析技术包括支撑板,所述支撑板的上端面包括依次设置的上样区、划线区及吸水区,所述划线区内设置结合链霉亲和素的检测线T和捕获探针的质控线C,所述捕获探针序列如SEQIDNO.5所示;本发明的检测方法灵敏度高,特异性强,操作简单,结果可肉眼观测到。

主权项:1.基于CRISPRCas9的胃癌相关LncRNAHOXA10的检测试纸条方法,其特征在于:该方法包括有以下步骤:S1:使用TransZol试剂从临床样品中提取总RNA;S2:以提取的RNA为模板,使用针对LncHOXA10特异性的引物对,采用一步法逆转录重组酶聚合酶扩增技术进行扩增,获得生物素功能化的双链产物;S3:将适量金纳米探针、Cas9蛋白、sgRNA和双链产物在上样缓冲溶液中混合,并孵育一段时间,将复合物加入侧向流试纸条的检测区进行检测,根据检测线的显色结果实现待测临床样品中胃癌相关LncRNAHOXA10的定性或定量检测。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 安徽医科大学 基于CRISPR/Cas9的胃癌相关LncRNA HOXA10的检测试纸条方法及其应用

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