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申请/专利权人:沈阳农业大学
摘要:本发明涉及绒山羊基因检测技术领域,具体为绒山羊泌乳相关基因PRL和PRLR的分型应用,包括:绒山羊血样采集:所述提取DNA的血液样本为1毫升,所述采血后放入含有EDTA的采血管中,‑20℃保存,DNA的提取:所述DNA提取使用EZ‑10旋转柱血液基因组DNA纯化试剂盒,‑20℃保存,产绒性能数据:所述羊绒数据由畜牧科学研究院进行采集与统计分析。本发明发现了PRL基因C442T和PRLR基因G168061A中CC和GG基因型对泌乳性能非常有利,GCGC是泌乳的优势单倍型,在体内和羊绒生产中都有良好的表现,且通过确定的基因型和基因组合,包括PRL基因的CC基因型和PRLR基因的GG基因型及组合GCGC,可以作为未来深入研究的分子标记,获得更多应用研究成果。
主权项:1.绒山羊泌乳相关基因PRL和PRLR的分型应用,其特征在于,包括:绒山羊血样采集:所述提取DNA的血液样本为1毫升,所述采血后放入含有EDTA的采血管中,-20℃保存。DNA的提取:所述DNA提取使用EZ-10旋转柱血液基因组DNA纯化试剂盒,-20℃保存。产绒性能数据:所述羊绒数据由畜牧科学研究院进行采集与统计分析。体尺测量数据:按照中国农业出版社出版的《家畜育种学》中提到的测试方法进行测量。产奶性能数据:产奶性能数据由生产性能检测中心测得。引物设计:由于尚未发现山羊PRL基因序列,我们在国际生物技术信息中心NCBI找到并利用了牛PRL基因和山羊PRLR基因的完整基因序列,设计了该基因编码区的特异性引物根据两个基因的全序列使用PrimerPremier5.0。产物扩增:所述PCR反应在50μl体系中进行,其中加入25μl2XSanTaqPCRMixpremix、1μlDNA模板、2μlPrimer’Fi、2μlPrimer’Ri和20μl灭菌ddH2O,PCR程序设置为94℃变性3分钟,94℃变性30秒,50℃退火30秒,72℃延伸60秒,最后72℃延伸10分钟,PCR产物通过在1%琼脂糖凝胶中使用溴化乙锭的电泳进行评估。
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百度查询: 沈阳农业大学 绒山羊泌乳相关基因PRL和PRLR的分型应用
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