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申请/专利权人:中南大学湘雅医院
摘要:一种ddPCR定量检测急性白血病MLL‑AF4融合基因的方法与试剂盒,一种基于数字PCR定量检测急性白血病相关融合基因表达的引物组合,包括:根据急性白血病相关融合基因:MLL‑AF4的基因序列设计的多条特异性引物,以及根据正常的ABL1基因序列设计的内参引物。
主权项:1.一种基于数字PCR定量检测急性白血病相关融合基因表达的引物组合,其特征在于,包括:根据急性白血病相关融合基因:MLL-AF4的基因序列设计的多条特异性引物,以及根据正常的ABL1基因序列设设计的内参引物;用于检测MLL-AF4融合基因的SeqIDNo.1-2所示核苷酸序列的引物和SeqIDNo.5所示核苷酸序列的探针;用于检测ABL1基因内参的SeqIDNo.3-4所示核苷酸序列的引物和SeqIDNo.6所示核苷酸序列的探针;筛选扩增效率一致且阴性阳性微滴明显分离的引物,最终选定的检测用引物和探针序列如下: 序列号 序列名称 核酸序列5’-3’ SEQIDNO.1 MLL-AF4-F1 GCAGATGGAGTCCACAGGATCAG SEQIDNO.2 MLL-AF4-R1 GGGAAAGGAAACTTGGATGGC SEQIDNO.3 ABL1-F1 GGGCGTGTGGAAGAAATA SEQIDNO.4 ABL1-R1 ACCAGGTTAGGGTGTTTGA SEQIDNO.5 MLL-AF4-P1 ATTCATGGCCGCCTCCTTTGGCAG SEQIDNO.6 ABL1-P1 AGACCTTGAAGGAGGACACC 所述探针的5’端连接荧光报告基团,3’端淬灭基团连接;用于检测MLL-AF4融合基因的探针5’端标记为FAM荧光修饰,3’端标记为BHQ1淬灭修饰;用于检测ABL1基因内参的探针5’端标记为ROX荧光修饰,3’端标记为BHQ2淬灭修饰。
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百度查询: 中南大学湘雅医院 ddPCR定量检测急性白血病MLL-AF4融合基因的方法与试剂盒
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