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申请/专利权人：重庆医科大学

摘要：本发明提供了一种用于非小细胞肺癌CYFRA21‑1检测的电致化学发光免疫传感器，以AuNPs为传感界面、CS@La‑TCPPAuAb2为信号探针，经过Ab1、Ab2和CYFRA21‑1的特异性结合，成功构建了ECL免疫传感器。与传统的CYFRA21‑1检测方法相比，本发明的优点在于灵敏度高，特异性强，检测迅速，操作方便，设备材料价格低廉，无污染，从而为CYFRA21‑1的检测提供了新的分析方法。

主权项：1.一种用于CYFRA21-1检测的电致化学发光免疫传感器，其特征在于，用于CYFRA21-1检测的电致化学发光免疫传感器的构建方法为：将用食人鱼洗液浸泡后经Al2O3粉末抛光呈镜面的玻碳电极在0.5MH2SO4中进行电化学活化，然后用超纯水冲洗，干燥得到干燥的玻碳电极；将干燥的玻碳电极浸入1％HAuCl4溶液沉积30-35S，室温干燥后滴加抗体Ab1溶液，4-5℃孵育10-12h，然后滴加1%牛血清蛋白BSA溶液，4-5℃孵育0.5-1h，再滴加目标物CYFRA21-1溶液，4-5℃孵育1-1.5h，最后滴加信号探针CS@La-TCPPAuNPsAb2溶液，4-5℃孵育1.5-2h，即得到用于CYFRA21-1检测的电致化学发光免疫传感器；所述CYFRA21-1为细胞角蛋白片段抗原21-1；所述信号探针CS@La-TCPPAuNPsAb2溶液的制备步骤为：向CS@LaTCPPAuNPs分散液中加入抗体Ab2溶液，冰浴搅拌10-12h，离心和沉淀物水洗，将沉淀物重新分散于超纯水中，即得到CS@La-TCPPAuNPsAb2的信号探针溶液；所述CS@LaTCPPAuNPs分散液的制备步骤为：将AuNPs加入到CS@La-TCPP分散液中，在常温下搅拌7-8h，离心和沉淀物洗涤，再将沉淀物分散在超纯水中，即得到CS@La-TCPPAuNPs分散液；所述CS@La-TCPP分散液的制备步骤为：壳聚糖CS溶于0.1wt%冰醋酸溶液中，分散均匀，取La-TCPP分散在超纯水中，加入CS溶液，磁力搅拌10-12h得到分散均匀的CS@La-TCPP溶液；离心和沉淀物用超纯水洗涤后，再将沉淀物分散于超纯水中，得到CS@La-TCPP分散液；所述La-TCPP的制备步骤为：将LaNO33·6H2O、TCPP分别溶于N,N-二甲基甲酰胺溶液中，分别室温超声10-12min，然后，在硅油浴中将TCPP溶液加热到100-130℃，再加入LaNO33·6H2O溶液，在连续磁力搅拌下，将混合物在100-130℃条件下反应5-6h，冷却至室温后离心和沉淀用纯水洗涤三次，烘箱50-60℃干燥，得到黑色的La-TCPP。

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百度查询： 重庆医科大学 用于非小细胞肺癌CYFRA21-1检测的电致化学发光免疫传感器及检测方法