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一种用于检测喉癌标志物CYFRA21-1的检测试剂及其应用 

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申请/专利权人:扬州大学附属医院(扬州市第一人民医院)

摘要:本发明属于生物标志物分析检测领域,具体涉及一种用于检测喉癌标志物CYFRA21‑1的检测试剂及其应用。该检测试剂包括SERS探针、捕获探针和多肽‑DNA偶联探针;SERS探针的制备方法包括:将4‑MBA标记金纳米双锥修饰上活化后的hpDNA1得到SERS探针;捕获探针的制备方法包括:将活化后的MBs表面修饰上活化的hpDNA2得到捕获探针;多肽‑DNA偶联探针的制备方法包括:将DNA1和DNA2分别修饰到Ab1和Ab2表面得到多肽‑DNA偶联探针。基于该检测试剂的检测方法相比现有的蛋白类标志物检测技术,具有更低的检出限,其中CYFRA21‑1的检出限低至0.76pgmL。

主权项:1.用于检测喉癌标志物CYFRA21-1的检测试剂,其特征在于,包括SERS探针、捕获探针和多肽-DNA偶联探针;SERS探针的制备方法包括:将4-MBA标记金纳米双锥修饰上活化后的hpDNA1得到SERS探针;捕获探针的制备方法包括:将活化后的MBs表面修饰上活化的hpDNA2得到捕获探针;多肽-DNA偶联探针的制备方法包括:将Ab1和Ab2溶液与N-马来酰亚胺甲基环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯的磷酸缓冲盐溶液反应得混合液a;硫代寡链核苷酸DNA1和DNA2与二硫苏糖醇在磷酸缓冲盐溶液中孵育得混合液b;将混合液a和混合液b纯化得多肽-DNA偶联探针;SERS探针的制备方法包括:将GNBPs溶液和4-MBA溶液孵育,离心和纯化得4-MBA修饰GNBPs溶液;将hpDNA1溶液使用三2-羧乙基膦缓冲液活化得活化hpDNA1溶液;将4-MBA修饰GNBPs溶液和活化hpDNA1溶液混合孵育,纯化得SERS探针;捕获探针的制备方法包括:将MBs溶液、1-乙基-3-二甲基氨基丙基碳酰二亚胺溶液和N-羟基琥珀酰亚胺溶液混合孵育得到MBs表面活化溶液;将活化hpDNA2溶液与MBs表面活化溶液混合孵育,分离,洗涤得捕获探针。

全文数据:

权利要求:

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