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申请/专利权人：上海市同济医院
摘要：本发明涉及一种小鼠脂肪干细胞外泌体制备方法，包括以下步骤：取对数生长的第3至6代的小鼠脂肪干细胞用含10％FBS的DMEM培养液培养，直到细胞密度达到70％‑80％，换用含10％无外泌体FBS的DMEM培养液继续培养45‑50小时，收集上清培养液，离心除去细胞和细胞碎片，再用100kDa分子量的超滤管于1500‑2500g下离心30min浓缩，将外泌体快速提取试剂加入到浓缩液提取，离心，收集小鼠脂肪干细胞外泌体。本发明的方法显著提高了小鼠脂肪干细胞外泌体的产量和提取效率，且避免了超速离心等外泌体提取方法费时费力、产量低及可能损坏外泌体结构并影响其生物活性的缺陷，所制备的脂肪干细胞外泌体能显著促进小鼠毛发生长。
主权项：1.小鼠脂肪干细胞外泌体在制备防脱发或护发的化妆品中的应用，其特征在于，所述小鼠脂肪干细胞外泌体是按照以下方法制备得到的：a取对数生长的第3至6代的小鼠脂肪干细胞，用10％FBSDMEM培养液培养，直到细胞密度达到70％-80％，吸走原培养液，用PBS清洗，换用含10％无外泌体FBS的DMEM培养液继续在37℃、5％CO2培养箱中培养45-50小时，收集上清培养液；b3000g×15min离心上清培养液以除去细胞和细胞碎片，将上清液转移至100kDa分子量的超滤管中再次1500g离心30min，收集浓缩液；c将外泌体提取试剂加入到浓缩液中，轻轻颠倒混匀，放置4℃下至少12h；d将混合物离心，4℃，1500g×30min，小心弃上清，加入PBS继续离心1500g×5min，吸去残余液体，即得所述小鼠脂肪干细胞外泌体；所述小鼠脂肪干细胞分离自5-10天龄C57BL6小鼠，步骤a中，换用含10％无外泌体FBS的DMEM培养液后继续培养48小时，开始收集上清培养液，步骤a中吸走原培养液后用PBS清洗1-3次。
全文数据：
权利要求：
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