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申请/专利权人：中国科学院水生生物研究所

摘要：本发明涉及微藻生物技术领域，具体为一种利用佐夫色绿藻发酵生产天然虾青素的方法，该方法将佐夫色绿藻的发酵培养过程分为细胞生长阶段和诱导虾青素积累阶段，在细胞生长阶段以最适宜的生长条件，即在pH6.0‑7.0和全营养型基础培养基和生长补料培养基条件下快速增长至170‑180gL的高密度生物质，接着将pH控制在3‑5或8‑10范围内并提供缺氮和或缺磷的诱导补料培养基进行诱导培养，以胁迫藻细胞快速积累虾青素。本发明不仅可提高细胞中虾青素的含量％，DCW，还能提高发酵液中细胞干重增加细胞数量，借此可大大提高发酵液中虾青素的产量，使佐夫色绿藻发酵生产天然虾青素具有很好的商业转化前景。

主权项：1.一种利用佐夫色绿藻发酵生产天然虾青素的方法，其特征在于，包括：将佐夫色绿藻藻种接种到发酵罐基础培养基中进行发酵培养，培养温度为22-30℃，通风比vvm为0.5-2:1，搅拌速度和溶解氧偶联控制使溶解氧控制在5％-80％；基础培养基为改良Endo培养基；发酵培养过程分为细胞生长阶段和诱导虾青素积累两个阶段；在细胞生长阶段，培养过程中控制发酵液pH在6.0-7.0，同时监控发酵液的葡萄糖浓度，在发酵液的葡萄糖浓度≤5gL时，补充生长补料培养基进行流加培养，直到细胞干重达到170-180gL时细胞生长阶段结束，转入诱导虾青素积累阶段并将生长补料培养基切换成诱导补料培养基；在诱导虾青素积累阶段，将发酵液pH控制在3-5或8-10以进行诱导培养，同时监控发酵液的葡萄糖浓度，根据葡萄糖浓度的变化适时调节诱导补料培养基的补料速度以控制整个诱导虾青素积累阶段的葡萄糖浓度为1-20gL；当连续两次取样点样品发酵干重不变或开始下降时，发酵培养结束，对藻细胞进行收获以获取虾青素；所述生长补料培养基为全营养培养基，为浓缩的改良Endo培养基；所述诱导补料培养基是在全营养培养基为基础进行缺氮和或缺磷调整得到的培养基；在所述基础培养基和生长补料培养基中，碳源为葡萄糖，氮源为氯化铵，磷源为磷酸二氢钾；基础培养基中葡萄糖浓度为20±2gL，氯化铵浓度为1.5±0.15gL，磷酸二氢钾浓度为0.2±0.02gL；生长补料培养基中葡萄糖浓度为750±20gL，氯化铵浓度为18-37.5gL，磷酸二氢钾浓度为60±5gL。

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