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申请/专利权人：勃林格殷格翰国际公司
摘要：本发明涉及用于检测包含在细胞培养中的真核细胞中产生的感兴趣的重组蛋白质的样品中的污染性宿主细胞蛋白质的羧酸酯酶活性的方法，其包括使样品与亲水性底物HPTS酯接触，并且任选地另外分开地使样品与亲脂性底物4‑MU酯接触，并且通过检测所释放的生色团的荧光强度使用亲水性底物和任选的亲脂性底物来检测至少一种污染性宿主细胞蛋白质的羧酸酯酶活性和任选的脂酶活性。进一步提供了用于制造感兴趣的重组蛋白质的方法，其包括使用用于检测包含在细胞培养中的真核细胞中产生的感兴趣的重组蛋白质的样品中的污染性宿主细胞蛋白质的羧化酶活性的方法，使用亲水性底物和任选地进一步的亲脂性底物用于确定在制造期间在包含感兴趣的重组蛋白质的样品中的污染性羧酸酯酶活性和或脂酶活性。
主权项：1.一种用于检测包含在真核细胞中产生的感兴趣的重组蛋白质的样品中的污染性宿主细胞蛋白质的羧酸酯酶活性的方法，其包括：a提供包含在细胞培养中的真核细胞中产生的感兴趣的重组蛋白质和至少一种污染性宿主细胞蛋白质的至少一种样品；b使所述至少一种样品与反应溶液包含亲水性底物接触以形成反应混合物，其中所述反应溶液包含：ipH为约pH4至约pH8的缓冲液，ii亲水性底物，其中所述底物是1-羟基芘-3,6,8-三磺酸或其盐的饱和无支链脂肪酸C6-C12酯底物HPTS酯，和iii任选的非缓冲盐；c使反应混合物中的样品和底物温育；d通过测量底物HPTS酯的水解并检测所释放的生色团1-羟基芘-3,6,8-三磺酸或其盐HPTS的荧光强度，来检测至少一种污染性宿主细胞蛋白质的羧酸酯酶活性；任选地在根据步骤c使反应混合物中的样品和底物温育的同时，通过检测所释放的生色团HPTS在一段时间内的荧光强度来测量水解。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 勃林格殷格翰国际公司 用于检测污染性羧酸酯酶活性的方法
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