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申请/专利权人：北京化工大学
摘要：本发明公开了无需编码微珠配对的高通量单细胞转录组测序微流控芯片，包括抽真空盖部、微通道部和微井部。通过在大规模微井阵列中微井的底部共价连接核苷酸序列，得到特异性分子条形码阵列用以捕获mRNA。并通过向微通道中通入细胞悬液，使得细胞在重力作用下沉积入微井中，实现单细胞的分离。加冻融裂解液使得被微井捕获的细胞裂解后，细胞释放的mRNA被微井底部的核苷酸序列捕获，实现mRNA的固相捕获与标记。本设计使用的固相捕获方式革新了传统的编码微珠与细胞配对隔离以溯源单细胞转录组的方法。这一创新性方法的使用彻底突破了细胞和微珠在捕获以及配对时的随机性，彻底摆脱了泊松分布的限制，极大减少了试剂的浪费，提升了mRNA捕获的效率。
主权项：1.无需编码微珠配对的高通量单细胞转录组测序微流控芯片，其特征在于，包含一个微井部4；微井部4包括自上而下的通孔阵列层17和衬底层18；通孔阵列层17上具有i*j个用于单个细胞捕获的上下贯通的通孔9，通孔阵列层17底部与衬底层18上表面紧密贴合；衬底层18上表面暴露在每个通孔9中的部分均固定有大规模用于捕获细胞转录组mRNA的核苷酸序列，且同一通孔9对应的所有核苷酸序列中均带有一段代表该通孔位置信息的二维细胞编码序列，同一通孔9的二维细胞编码序列段相同，不同通孔9则不同，实现单细胞转录组溯源和单细胞位置溯源；使用固相捕获的方式，彻底突破细胞和微珠在捕获以及配对时的随机性。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 北京化工大学 无需编码微珠配对的高通量单细胞转录组测序微流控芯片
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