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一种提高蛋白表达量的真核表达载体及其应用 

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申请/专利权人:广州科方生物技术股份有限公司

摘要:本发明公开了一种提高蛋白表达量的真核表达载体,包含CMV‑CMV双启动子,所述CMV‑CMV双启动子由两个序列相同的CMV启动子顺向相连组成,本发明通过优化表达质粒基因的序列,主要是优化表达启动子,设计了CMV‑CMV双启动子,并对质粒的其他元件也进行了针对性构建,该真核表达载体可与目标基因精确结合并载入蛋白表达系统,大幅度提高蛋白表达量,且不影响蛋白原有性能,可以大幅度降低蛋白生产成本,且该蛋白并在Elisa平台检测验证,检测灵敏度、特异性均满足试剂的使用要求,本发明还公开了该真核表达载体在制备非检测目的的重组质粒、细胞株和检测试剂中的应用。

主权项:1.一种提高蛋白表达量的真核表达载体,其特征在于,所述真核表达载体包含以下以特定顺序排列的元件:CMV-CMV双启动子,T7primer:测序通用上游引物,Kozak序列,KpnI酶切位点,抗体基因序列,MCS,XbaI酶切位点,BGHreverseprimer:测序通用下游引物,及SV40earlypromoter:哺乳动物终止子;所述真核表达载体还包含复制起点pUCorigin;所述筛选标记基因为HygroR和AmpR;所述CMV-CMV双启动子由两个序列相同的CMV启动子直接顺向相连组成;所述CMV-CMV双启动子序列如SEQIDNO:1所示。

全文数据:

权利要求:

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