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摘要:本发明公开了一种高产5‑氨基乙酰丙酸的谷氨酸棒杆菌菌株及其应用,涉及生物技术领域。本发明首先通过将起始密码子从ATG替换为GTG,和或用弱RBS替换基因本身RBS以降低翻译强度来弱化谷氨酸棒杆菌中5‑氨基乙酰丙酸下游代谢途径相关酶的表达量,随后通过改造编码基因的启动子以增强转录强度来增强5‑氨基乙酰丙酸生产菌株中柠檬酸合酶的活性,结合5‑氨基乙酰丙酸合酶和透明颤菌血红蛋白的异源表达,构建了一株利用C4途径生产5‑氨基乙酰丙酸的谷氨酸棒杆菌菌株,该菌株在摇瓶水平能够生产9.2gL5‑氨基乙酰丙酸,与对照菌株比较产量提高了5.1倍,这为后续放大培养上罐发酵生产5‑氨基乙酰丙酸奠定了基础。
主权项:1.一种生产5-氨基乙酰丙酸的重组谷氨酸棒杆菌,其特征在于,所述重组谷氨酸棒杆菌中含有以下改造:异源表达5-氨基乙酰丙酸合酶和透明颤菌血红蛋白,弱化5-氨基乙酰丙酸脱水酶、卟胆原脱氨酶和尿卟啉原合酶的表达,强化柠檬酸合酶的表达;所述弱化包括将重组谷氨酸棒杆菌基因组上5-氨基乙酰丙酸脱水酶和尿卟啉原合酶的原RBS替换为SEQIDNO.9所示的RBS,并将重组谷氨酸棒杆菌基因组上5-氨基乙酰丙酸脱水酶、卟胆原脱氨酶和尿卟啉原合酶编码基因的起始密码子替换为GTG。
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权利要求:
百度查询: 宁夏蓝因生物科技有限公司 一种高产5-氨基乙酰丙酸的谷氨酸棒杆菌菌株及其应用
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