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摘要:本发明提供了一种具有以L‑谷氨酸为底物的丙二酰辅酶A合成路径的基因重组工程菌株及其应用,涉及生物工程技术领域。本发明通过将具有2‑氧代戊二酸加氧酶基因表达系统、3‑羟基‑L‑谷氨酸醛缩酶基因表达系统、丙二酰辅酶A还原酶或CoA乙酰化醛脱氢酶基因表达系统的重组表达载体转染至底盘菌株感受态细胞中,可实现2‑氧代戊二酸加氧酶、3‑羟基‑L‑谷氨酸醛缩酶和丙二酰辅酶A还原酶的共表达,进而在转化细胞中实现以L‑谷氨酸为底物经生物合成得到丙二酰辅酶A的合成路径。使用上述重组表达载体构建得到的耶氏解脂酵母工程菌株,经验证可显著提高耶氏解脂酵母工程菌株中以丙二酰辅酶A为生物合成中间体的高值化合物的产量。
主权项:1.一种重组表达载体,其特征在于,所述重组表达载体的骨架载体是pYLXP’或pUrlp,且包括以下可操作性相连的元件:a2-氧代戊二酸加氧酶基因表达系统,该系统从5’到3’依次包括元件:启动子,2-氧代戊二酸加氧酶基因和终止子;和,b3-羟基-L-谷氨酸醛缩酶基因表达系统,该系统从5’到3’依次包括元件:启动子,3-羟基-L-谷氨酸醛缩酶基因和终止子;和,c丙二酰辅酶A还原酶基因表达系统,该系统从5’到3’依次包括元件:启动子,丙二酰辅酶A还原酶基因和终止子;所述a、b、c中的启动子为带有内含子序列的TEF启动子;所述a、b、c中的终止子为XPR2终止子。
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百度查询: 广东以色列理工学院 具有以L-谷氨酸为底物的丙二酰辅酶A合成路径的基因重组工程菌株及其应用
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